| 出品公司: | EMD Biosciences(Novagen) |
|---|---|
| 别名: | pET32b, pet 32b |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达 |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5899bp |
| 5' 测序引物: | T7或者Trx-F |
| 5' 测序引物序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; Trx-F: 5' TTCCTCGACGCTAACCTG 3' |
| 载体标签: | thioredoxin (N端); His (中间和C端) |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 表达宿主菌: | Origami2(DE3) 、 Origami(DE3)、OrigamiB(DE3)、BL21-TrxB(DE3) |
| 备注: |
Production of soluble, active target proteins; N-term thrombin cleavage site;
Nterm enterokinase cleavage site; a,b,c vary by MCS |
| 产品目录号: | 69016-3 |
| 稳定性: | 瞬时表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
| 表达宿主菌2: | BL21(DE3) 、BLR(DE3)、Rosetta(DE3)、OrigamiB(DE3) |
| pET表达手册： |
pET表达手册英文版 pET表达手册中文版 |
| pET载体汇总: |
pET-3a pET-11a pET-12a pET-14b pET-15b pET-16b pET-17b pET-19b pET-20b pET-21a pET-22b pET-23a pET-24a pET-25b pET-26b pET-27b pET-28a pET-29a pET-30a pET-31b pET-32a pET-33b pET-34b pET-35b pET-37b pET-39b pET-40b pET-41a pET-42a pET-43.1a pET-44a pET-45b pET-47b pET-48b pET-49b pET-50b pET-51b pET-52b pETDuet-1 pACYCDuet-1 pCDFDuet-1 pRSFDuet-1 pColaDuet-1 |
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pET32b载体基本信息
pET32b载体图谱质粒图谱和多克隆位点信息
pET32b载体简介
pET32系列载体是设计用来克隆构建和高水平融合表达表达带有109个氨基酸Trx标签的蛋白质序列。将基因插入到载体的多克隆位点，能够获得融合表达蛋白质。同时融合蛋白包含有His标签和S标签，这些可以用于蛋白表达检测和纯化过程。 载体的多克隆位点见上面的图谱。需要注意的是图谱中的核苷酸编码顺序是以pBR322载体的复制方向为正方向，所以T7表达区域在图谱中是处于反向的位置。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pET32b载体序列
LOCUS pET-32b(+) 5899 bp DNA circular 11-SEP-2008
SOURCE
ORGANISM
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
promoter complement(763..779)
/vntifkey="30"
/label=T7\promoter
misc_signal complement(365..691)
/vntifkey="87"
/label=trx\tag
protein_bind complement(326..343)
/vntifkey="31"
/label=His\tag
misc_feature complement(248..292)
/vntifkey="21"
/label=S\tag
protein_bind complement(140..157)
/vntifkey="31"
/label=His\tag
terminator complement(26..72)
/vntifkey="43"
/label=T7\terminator
CDS 1170..2249
/vntifkey="4"
/label=lac\I
rep_origin complement(3683..3683)
/vntifkey="33"
/label=ColE1\pBR322\origin
CDS complement(736..760)
/vntifkey="4"
/label=lac\operator
protein_bind complement(299..316)
/vntifkey="31"
/label=thrombin
protein_bind complement(218..232)
/vntifkey="31"
/label=enterokinase
CDS complement(4444..5301)
/vntifkey="4"
/label=bla\(amp)\sequence
rep_origin complement(5433..5888)
/vntifkey="33"
/label=f1\origin
BASE COUNT 1390 a 1564 c 1560 g 1385 t
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccgatatcg ccatggcctt gtcgtcgtcg tcggtaccca
241 gatctgggct gtccatgtgc tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttcataccag
301 aaccgcgtgg caccagacca gaagaatgat gatgatgatg gtgcatatgg ccagaaccag
361 aaccggccag gttagcgtcg aggaactctt tcaactgacc tttagacagt gcacccactt
421 tggttgccgc cacttcaccg tttttgaaca gcagcagagt cgggatacca cggatgccat
481 atttcggcgc agtgccaggg ttttgatcga tgttcagttt tgcaacggtc agtttgccct
541 gatattcgtc agcgatttca tccagaatcg gggcgatcat tttgcacgga ccgcaccact
601 ctgcccagaa atcgacgagg atcgccccgt ccgctttgag tacatccgtg tcaaaactgt
661 cgtcagtcag gtgaataatt ttatcgctca tatgtatatc tccttcttaa agttaaacaa
721 aattatttct agaggggaat tgttatccgc tcacaattcc cctatagtga gtcgtattaa
781 tttcgcggga tcgagatcga tctcgatcct ctacgccgga cgcatcgtgg ccggcatcac
841 cggcgccaca ggtgcggttg ctggcgccta tatcgccgac atcaccgatg gggaagatcg
901 ggctcgccac ttcgggctca tgagcgcttg tttcggcgtg ggtatggtgg caggccccgt
961 ggccggggga ctgttgggcg ccatctcctt gcatgcacca ttccttgcgg cggcggtgct
1021 caacggcctc aacctactac tgggctgctt cctaatgcag gagtcgcata agggagagcg
1081 tcgagatccc ggacaccatc gaatggcgca aaacctttcg cggtatggca tgatagcgcc
1141 cggaagagag tcaattcagg gtggtgaatg tgaaaccagt aacgttatac gatgtcgcag
1201 agtatgccgg tgtctcttat cagaccgttt cccgcgtggt gaaccaggcc agccacgttt
1261 ctgcgaaaac gcgggaaaaa gtggaagcgg cgatggcgga gctgaattac attcccaacc
1321 gcgtggcaca acaactggcg ggcaaacagt cgttgctgat tggcgttgcc acctccagtc
1381 tggccctgca cgcgccgtcg caaattgtcg cggcgattaa atctcgcgcc gatcaactgg
1441 gtgccagcgt ggtggtgtcg atggtagaac gaagcggcgt cgaagcctgt aaagcggcgg
1501 tgcacaatct tctcgcgcaa cgcgtcagtg ggctgatcat taactatccg ctggatgacc
1561 aggatgccat tgctgtggaa gctgcctgca ctaatgttcc ggcgttattt cttgatgtct
1621 ctgaccagac acccatcaac agtattattt tctcccatga agacggtacg cgactgggcg
1681 tggagcatct ggtcgcattg ggtcaccagc aaatcgcgct gttagcgggc ccattaagtt
1741 ctgtctcggc gcgtctgcgt ctggctggct ggcataaata tctcactcgc aatcaaattc
1801 agccgatagc ggaacgggaa ggcgactgga gtgccatgtc cggttttcaa caaaccatgc
1861 aaatgctgaa tgagggcatc gttcccactg cgatgctggt tgccaacgat cagatggcgc
1921 tgggcgcaat gcgcgccatt accgagtccg ggctgcgcgt tggtgcggac atctcggtag
1981 tgggatacga cgataccgaa gacagctcat gttatatccc gccgttaacc accatcaaac
2041 aggattttcg cctgctgggg caaaccagcg tggaccgctt gctgcaactc tctcagggcc
2101 aggcggtgaa gggcaatcag ctgttgcccg tctcactggt gaaaagaaaa accaccctgg
2161 cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac
2221 gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caattaatgt aagttagctc
2281 actcattagg caccgggatc tcgaccgatg cccttgagag ccttcaaccc agtcagctcc
2341 ttccggtggg cgcggggcat gactatcgtc gccgcactta tgactgtctt ctttatcatg
2401 caactcgtag gacaggtgcc ggcagcgctc tgggtcattt tcggcgagga ccgctttcgc
2461 tggagcgcga cgatgatcgg cctgtcgctt gcggtattcg gaatcttgca cgccctcgct
2521 caagccttcg tcactggtcc cgccaccaaa cgtttcggcg agaagcaggc cattatcgcc
2581 ggcatggcgg ccccacgggt gcgcatgatc gtgctcctgt cgttgaggac ccggctaggc
2641 tggcggggtt gccttactgg ttagcagaat gaatcaccga tacgcgagcg aacgtgaagc
2701 gactgctgct gcaaaacgtc tgcgacctga gcaacaacat gaatggtctt cggtttccgt
2761 gtttcgtaaa gtctggaaac gcggaagtca gcgccctgca ccattatgtt ccggatctgc
2821 atcgcaggat gctgctggct accctgtgga acacctacat ctgtattaac gaagcgctgg
2881 cattgaccct gagtgatttt tctctggtcc cgccgcatcc ataccgccag ttgtttaccc
2941 tcacaacgtt ccagtaaccg ggcatgttca tcatcagtaa cccgtatcgt gagcatcctc
3001 tctcgtttca tcggtatcat tacccccatg aacagaaatc ccccttacac ggaggcatca
3061 gtgaccaaac aggaaaaaac cgcccttaac atggcccgct ttatcagaag ccagacatta
3121 acgcttctgg agaaactcaa cgagctggac gcggatgaac aggcagacat ctgtgaatcg
3181 cttcacgacc acgctgatga gctttaccgc agctgcctcg cgcgtttcgg tgatgacggt
3241 gaaaacctct gacacatgca gctcccggag acggtcacag cttgtctgta agcggatgcc
3301 gggagcagac aagcccgtca gggcgcgtca gcgggtgttg gcgggtgtcg gggcgcagcc
3361 atgacccagt cacgtagcga tagcggagtg tatactggct taactatgcg gcatcagagc
3421 agattgtact gagagtgcac catatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag
3481 aaaataccgc atcaggcgct cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt
3541 tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta atacggttat ccacagaatc
3601 aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa
3661 aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa
3721 tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc
3781 ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc
3841 cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag
3901 ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga
3961 ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc
4021 gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac
4081 agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga aggacagtat ttggtatctg
4141 cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca
4201 aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa
4261 aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa
4321 ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt atcaaaaagg atcttcacct agatcctttt
4381 aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta aagtatatat gagtaaactt ggtctgacag
4441 ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat ctcagcgatc tgtctatttc gttcatccat
4501 agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac tacgatacgg gagggcttac catctggccc
4561 cagtgctgca atgataccgc gagacccacg ctcaccggct ccagatttat cagcaataaa
4621 ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca actttatccg cctccatcca
4681 gtctattaat tgttgccggg aagctagagt aagtagttcg ccagttaata gtttgcgcaa
4741 cgttgttgcc attgctgcag gcatcgtggt gtcacgctcg tcgtttggta tggcttcatt
4801 cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt tacatgatcc cccatgttgt gcaaaaaagc
4861 ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt cagaagtaag ttggccgcag tgttatcact
4921 catggttatg gcagcactgc ataattctct tactgtcatg ccatccgtaa gatgcttttc
4981 tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt ctgagaatag tgtatgcggc gaccgagttg
5041 ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac cgcgccacat agcagaactt taaaagtgct
5101 catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa actctcaagg atcttaccgc tgttgagatc
5161 cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa ctgatcttca gcatctttta ctttcaccag
5221 cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca aaatgccgca aaaaagggaa taagggcgac
5281 acggaaatgt tgaatactca tactcttcct ttttcaatat tattgaagca tttatcaggg
5341 ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag aaaaataaac aaataggggt
5401 tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc tgaaattgta aacgttaata ttttgttaaa
5461 attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc attttttaac caataggccg aaatcggcaa
5521 aatcccttat aaatcaaaag aatagaccga gatagggttg agtgttgttc cagtttggaa
5581 caagagtcca ctattaaaga acgtggactc caacgtcaaa gggcgaaaaa ccgtctatca
5641 gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc ctaatcaagt tttttggggt cgaggtgccg
5701 taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag cccccgattt agagcttgac ggggaaagcc
5761 ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa agcgaaagga gcgggcgcta gggcgctggc
5821 aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac cacacccgcc gcgcttaatg cgccgctaca
5881 gggcgcgtcc cattcgcca
//
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