pET-47b(+)

价格:800元

联系方式:I47-825O-882O

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pET47b载体基本信息

出品公司: EMD Biosciences (Novagen)
别名: pET47b, pET 47b
质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达
表达水平:
克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小: 5203 bp
5' 测序引物及序列:   T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物及序列:   T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
载体标签: N-His, C-S, C-Thrombin
载体抗性: 卡那
表达宿主菌: BL21(DE3) Rosetta2(DE3)C43(DE3)
备注:
载体含有HRV 3C蛋白酶切位点,可以在低温条件下将多余的融合表达蛋白切除。载体上还有C端Thrombin蛋白酶切位点可以使用。
产品目录号: 71461-3
稳定性: 瞬时表达 Transient
组成型: 组成型 Constitutive
病毒/非病毒: 非病毒

pET47b载体质粒图谱和多克隆位点信息

pET-47b载体图谱



pET-47b多克隆位点

pET-47b载体特征

pET47b载体简介

pET47b载体携带有N端His纯化标签,紧跟着有一个HRV 3C蛋白酶切位点。这个HRV 3C蛋白酶切位点能够特异性的高效 切割 “LEVLFQ↓GP”氨基酸序列,酶活力在低温下很强。pET-50b(+)载体上还含有一个可选择的C端Thrombin蛋白酶切位点和S标签序列。

pET-47b(+)载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。

T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pET Vectors 选择指南

pET47b载体序列

LOCUS       pET-47b(+)    5203 bp     DNA Circular    SYN
DEFINITION  pET-47b(+)
ACCESSION   
KEYWORDS    
SOURCE      
  ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT     This file is created by Vector NTI
            http://www.biofeng.com/
COMMENT     ORIGDB|GenBank
COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..5203
                     /organism="pET-47b(+)"
                     /mol_type="other DNA"
     terminator      complement(1..120)
                     /label="T7_terminator"
     misc_feature    69..87
                     /label="T7_Terminal_primer"
     CDS             345..1094
                     /label="ORF frame 3"    
     misc_feature    complement(374..390)
                     /label="T7_transl_en_RBS"
     misc_feature    complement(408..435)
                     /label="lacO"        
     promoter        complement(435..453)
                     /label="T7_promoter"          
     gene            489..752
                     /label="tet (300 - 563)"
                     /gene="tet (300 - 563)"            
     misc_feature    complement(541..560)
                     /label="pBRrevBam_primer"            
     misc_feature    835..1926
                     /label="lacI"            
     CDS             967..1926
                     /label="ORF frame 1"            
     misc_feature    2498..2689
                     /label="ROP"         
     misc_feature    complement(2683..2705)
                     /label="pGEX_3_primer"         
     rep_origin      complement(3104..3723)
                     /label="pBR322_origin"            
     gene            3829..4644
                     /label="KanR2"
                     /gene="KanR2"            
     CDS             3829..4644
                     /label="ORF frame 1"          
     rep_origin      complement(4869..5175)
                     /label="f1_origin"          
ORIGIN
    1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
   61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
  121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc
  181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct
  241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc
  301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg gtggtgatgt
  361 gccatatgta tatctccttc ttaaagttaa acaaaattat ttctagaggg gaattgttat
  421 ccgctcacaa ttcccctata gtgagtcgta ttaatttcgc gggatcgaga tcgatctcga
  481 tcctctacgc cggacgcatc gtggccggca tcaccggcgc cacaggtgcg gttgctggcg
  541 cctatatcgc cgacatcacc gatggggaag atcgggctcg ccacttcggg ctcatgagcg
  601 cttgtttcgg cgtgggtatg gtggcaggcc ccgtggccgg gggactgttg ggcgccatct
  661 ccttgcatgc accattcctt gcggcggcgg tgctcaacgg cctcaaccta ctactgggct
  721 gcttcctaat gcaggagtcg cataagggag agcgtcgaga tcccggacac catcgaatgg
  781 cgcaaaacct ttcgcggtat ggcatgatag cgcccggaag agagtcaatt cagggtggtg
  841 aatgtgaaac cagtaacgtt atacgatgtc gcagagtatg ccggtgtctc ttatcagacc
  901 gtttcccgcg tggtgaacca ggccagccac gtttctgcga aaacgcggga aaaagtggaa
  961 gcggcgatgg cggagctgaa ttacattccc aaccgcgtgg cacaacaact ggcgggcaaa
 1021 cagtcgttgc tgattggcgt tgccacctcc agtctggccc tgcacgcgcc gtcgcaaatt
 1081 gtcgcggcga ttaaatctcg cgccgatcaa ctgggtgcca gcgtggtggt gtcgatggta
 1141 gaacgaagcg gcgtcgaagc ctgtaaagcg gcggtgcaca atcttctcgc gcaacgcgtc
 1201 agtgggctga tcattaacta tccgctggat gaccaggatg ccattgctgt ggaagctgcc
 1261 tgcactaatg ttccggcgtt atttcttgat gtctctgacc agacacccat caacagtatt
 1321 attttctccc atgaagacgg tacgcgactg ggcgtggagc atctggtcgc attgggtcac
 1381 cagcaaatcg cgctgttagc gggcccatta agttctgtct cggcgcgtct gcgtctggct
 1441 ggctggcata aatatctcac tcgcaatcaa attcagccga tagcggaacg ggaaggcgac
 1501 tggagtgcca tgtccggttt tcaacaaacc atgcaaatgc tgaatgaggg catcgttccc
 1561 actgcgatgc tggttgccaa cgatcagatg gcgctgggcg caatgcgcgc cattaccgag
 1621 tccgggctgc gcgttggtgc ggacatctcg gtagtgggat acgacgatac cgaagacagc
 1681 tcatgttata tcccgccgtt aaccaccatc aaacaggatt ttcgcctgct ggggcaaacc
 1741 agcgtggacc gcttgctgca actctctcag ggccaggcgg tgaagggcaa tcagctgttg
 1801 cccgtctcac tggtgaaaag aaaaaccacc ctggcgccca atacgcaaac cgcctctccc
 1861 cgcgcgttgg ccgattcatt aatgcagctg gcacgacagg tttcccgact ggaaagcggg
 1921 cagtgagcgc aacgcaatta atgtaagtta gctcactcat taggcaccgg gatctcgacc
 1981 gatgcccttg agagccttca acccagtcag ctccttccgg tgggcgcggg gcatgactag
 2041 catgatcgtg ctcctgtcgt tgaggacccg gctaggctgg cggggttgcc ttactggtta
 2101 gcagaatgaa tcaccgatac gcgagcgaac gtgaagcgac tgctgctgca aaacgtctgc
 2161 gacctgagca acaacatgaa tggtcttcgg tttccgtgtt tcgtaaagtc tggaaacgcg
 2221 gaagtcagcg ccctgcacca ttatgttccg gatctgcatc gcaggatgct gctggctacc
 2281 ctgtggaaca cctacatctg tattaacgaa gcgctggcat tgaccctgag tgatttttct
 2341 ctggtcccgc cgcatccata ccgccagttg tttaccctca caacgttcca gtaaccgggc
 2401 atgttcatca tcagtaaccc gtatcgtgag catcctctct cgtttcatcg gtatcattac
 2461 ccccatgaac agaaatcccc cttacacgga ggcatcagtg accaaacagg aaaaaaccgc
 2521 ccttaacatg gcccgcttta tcagaagcca gacattaacg cttctggaga aactcaacga
 2581 gctggacgcg gatgaacagg cagacatctg tgaatcgctt cacgaccacg ctgatgagct
 2641 ttaccgcagc tgcctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct
 2701 cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg
 2761 cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg cgcagccatg acccagtcac gtagcgatag
 2821 cggagtgtat actggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat
 2881 atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc aggcgctctt
 2941 ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag
 3001 ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca
 3061 tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt
 3121 tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc
 3181 gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct
 3241 ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg
 3301 tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca
 3361 agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact
 3421 atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta
 3481 acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta
 3541 actacggcta cactagaagg acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct
 3601 tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt
 3661 tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga
 3721 tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca
 3781 tgaacaataa aactgtctgc ttacataaac agtaatacaa ggggtgttat gagccatatt
 3841 caacgggaaa cgtcttgctc taggccgcga ttaaattcca acatggatgc tgatttatat
 3901 gggtataaat gggctcgcga taatgtcggg caatcaggtg cgacaatcta tcgattgtat
 3961 gggaagcccg atgcgccaga gttgtttctg aaacatggca aaggtagcgt tgccaatgat
 4021 gttacagatg agatggtcag actaaactgg ctgacggaat ttatgcctct tccgaccatc
 4081 aagcatttta tccgtactcc tgatgatgca tggttactca ccactgcgat ccccggcaaa
 4141 acagcattcc aggtattaga agaatatcct gattcaggtg aaaatattgt tgatgcgctg
 4201 gcagtgttcc tgcgccggtt gcattcgatt cctgtttgta attgtccttt taacagtgat
 4261 cgcgtatttc gtctcgctca ggcgcaatca cgaatgaata acggtttggt tgatgcgagt
 4321 gattttgatg acgagcgtaa tggctggcct gttgaacaag tctggaaaga aatgcataaa
 4381 cttttgccat tctcaccgga ttcagtcgtc actcatggtg atttctcact tgataacctt
 4441 atttttgacg aggggaaatt aataggttgt attgatgttg gacgagtcgg aatcgcagac
 4501 cgataccagg atcttgccat cctatggaac tgcctcggtg agttttctcc ttcattacag
 4561 aaacggcttt ttcaaaaata tggtattgat aatcctgata tgaataaatt gcagtttcat
 4621 ttgatgctcg atgagttttt ctaagaatta attcatgagc ggatacatat ttgaatgtat
 4681 ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgaaat
 4741 tgtaaacgtt aatattttgt taaaattcgc gttaaatttt tgttaaatca gctcattttt
 4801 taaccaatag gccgaaatcg gcaaaatccc ttataaatca aaagaataga ccgagatagg
 4861 gttgagtgtt gttccagttt ggaacaagag tccactatta aagaacgtgg actccaacgt
 4921 caaagggcga aaaaccgtct atcagggcga tggcccacta cgtgaaccat caccctaatc
 4981 aagttttttg gggtcgaggt gccgtaaagc actaaatcgg aaccctaaag ggagcccccg
 5041 atttagagct tgacggggaa agccggcgaa cgtggcgaga aaggaaggga agaaagcgaa
 5101 aggagcgggc gctagggcgc tggcaagtgt agcggtcacg ctgcgcgtaa ccaccacacc
 5161 cgccgcgctt aatgcgccgc tacagggcgc gtcccattcg cca
//

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pET47b载体应用举例

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