pET-48b(+)

价格:800元

联系方式:I47-825O-882O

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pET48b载体基本信息

出品公司: EMD Biosciences (Novagen)
别名: pET48b, pET 48b
质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达
表达水平:
克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小: 5605 bp
5' 测序引物序列:   T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; Trx-F: 5'-TTCCTCGACGCTAACCTG-3'
3' 测序引物序列:   T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
载体标签: N-Trx, N-His,N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin
载体抗性: 卡那
表达宿主菌: Rosetta-gami2 、 Rosetta-gami2(DE3)
备注:
与pET47系列载体相同,但多了Trx标签。; 含有HRV 3C蛋白酶切位点,可以在低温下将融合标签切除。含有C端Thrombin蛋白酶切位点。
产品目录号: 71462-3
稳定性: 瞬时表达
组成型: 组成型
病毒/非病毒: 非病毒

pET48b载体质粒图谱和多克隆位点信息

pET-48b载体图谱



pET-48b多克隆位点

pET-48b载体特征

pET48b载体简介

pET-48b载体含有N端Trx和His标签,在标签后面紧跟着的是HRV 3C蛋白酶切位点。HRV 3C蛋白酶能够高特异性的识别LEVLFQ↓GP蛋白序列,能够在低温下高效切割掉融合标签序列。pET-48b载体还含有一个可选择的C端Thrombin蛋白酶切位点,紧接着位点后是S标签。

pET48b载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。

T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。

载体的单链测序应该使用S 18引物(Cat. No. 71262-3)。


pET Vectors 选择指南

pET48b载体序列

LOCUS       pET-48b(+)              5605 bp    DNA     circular     11-SEP-2008
DEFINITION  pET-48b(+).
SOURCE      
  ORGANISM  
COMMENT     This file is created by Vector NTI
            http://www.biofeng.com/
COMMENT     ORIGDB|GenBank
COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES             Location/Qualifiers
     rep_origin      complement(5146..5593)
                     /vntifkey="33"
                     /label=f1\ori
     misc_RNA        complement(3522..4077)
                     /vntifkey="53"
                     /label=RNA\II
     rep_origin      complement(3522..3522)
                     /vntifkey="33"
                     /label=ColE1,\pBR\ori
     misc_RNA        3962..4069
                     /vntifkey="53"
                     /label=RNA\I
     CDS             2900..3091
                     /vntifkey="4"
                     /label=ROP\gene
     CDS             1246..2328
                     /vntifkey="4"
                     /label=lacI
                     /note="lac repressor"
     promoter        complement(839..855)
                     /vntifkey="30"
                     /label=T7\promoter
     protein_bind    complement(814..834)
                     /vntifkey="31"
                     /label=lacO
     protein_bind    complement(342..359)
                     /vntifkey="31"
                     /label=His-Tag
     terminator      complement(26..73)
                     /vntifkey="43"
                     /label=T7\terminator
     CDS             4231..5046
                     /vntifkey="4"
                     /label=Kan
     misc_feature    complement(213..230)
                     /vntifkey="21"
                     /label=Thrombin\site
     protein_bind    complement(168..212)
                     /vntifkey="31"
                     /label=S-Tag
     CDS             complement(441..767)
                     /vntifkey="4"
                     /label=Trx-Tag
     protein_bind    complement(310..332)
                     /vntifkey="31"
                     /label=3c
     primer          complement(300..336)
                     /vntifkey="27"
                     /label=S-SacII/Bam\+SanDI\-dcm
     misc_feature    complement(234..315)
                     /vntifkey="21"
                     /label=MCS
     primer          complement(374..421)
                     /vntifkey="27"
                     /label=S-Tag\Spacer-Spe\I
BASE COUNT     1355 a      1434 c      1492 g      1324 t
ORIGIN
        1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
       61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
      121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc
      181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct
      241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc
      301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg atggtgatga
      361 ccagaaccac tagatggagt aggagtagga ggattgttat tagaaccgcc accaccacta
      421 gtatggccag aaccagaacc ggccaggtta gcgtcgagga actctttcaa ctgaccttta
      481 gacagtgcac ccactttggt tgccgccact tcaccgtttt tgaacagcag cagagtcggg
      541 ataccacgga tgccatattt cggcgcagtg ccagggtttt gatcgatgtt cagttttgca
      601 acggtcagtt tgccctgata ttcgtcagcg atttcatcca gaatcggggc gatcattttg
      661 cacggaccgc accactctgc ccagaaatcg acgaggatcg ccccgtccgc tttgagtaca
      721 tccgtgtcaa aactgtcgtc agtcaggtga ataattttat cgctcatatg tatatctcct
      781 tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac aattccccta
      841 tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatcgatctc gatcctctac gccggacgca
      901 tcgtggccgg catcaccggc gccacaggtg cggttgctgg cgcctatatc gccgacatca
      961 ccgatgggga agatcgggct cgccacttcg ggctcatgag cgcttgtttc ggcgtgggta
     1021 tggtggcagg ccccgtggcc gggggactgt tgggcgccat ctccttgcat gcaccattcc
     1081 ttgcggcggc ggtgctcaac ggcctcaacc tactactggg ctgcttccta atgcaggagt
     1141 cgcataaggg agagcgtcga gatcccggac accatcgaat ggcgcaaaac ctttcgcggt
     1201 atggcatgat agcgcccgga agagagtcaa ttcagggtgg tgaatgtgaa accagtaacg
     1261 ttatacgatg tcgcagagta tgccggtgtc tcttatcaga ccgtttcccg cgtggtgaac
     1321 caggccagcc acgtttctgc gaaaacgcgg gaaaaagtgg aagcggcgat ggcggagctg
     1381 aattacattc ccaaccgcgt ggcacaacaa ctggcgggca aacagtcgtt gctgattggc
     1441 gttgccacct ccagtctggc cctgcacgcg ccgtcgcaaa ttgtcgcggc gattaaatct
     1501 cgcgccgatc aactgggtgc cagcgtggtg gtgtcgatgg tagaacgaag cggcgtcgaa
     1561 gcctgtaaag cggcggtgca caatcttctc gcgcaacgcg tcagtgggct gatcattaac
     1621 tatccgctgg atgaccagga tgccattgct gtggaagctg cctgcactaa tgttccggcg
     1681 ttatttcttg atgtctctga ccagacaccc atcaacagta ttattttctc ccatgaagac
     1741 ggtacgcgac tgggcgtgga gcatctggtc gcattgggtc accagcaaat cgcgctgtta
     1801 gcgggcccat taagttctgt ctcggcgcgt ctgcgtctgg ctggctggca taaatatctc
     1861 actcgcaatc aaattcagcc gatagcggaa cgggaaggcg actggagtgc catgtccggt
     1921 tttcaacaaa ccatgcaaat gctgaatgag ggcatcgttc ccactgcgat gctggttgcc
     1981 aacgatcaga tggcgctggg cgcaatgcgc gccattaccg agtccgggct gcgcgttggt
     2041 gcggacatct cggtagtggg atacgacgat accgaagaca gctcatgtta tatcccgccg
     2101 ttaaccacca tcaaacagga ttttcgcctg ctggggcaaa ccagcgtgga ccgcttgctg
     2161 caactctctc agggccaggc ggtgaagggc aatcagctgt tgcccgtctc actggtgaaa
     2221 agaaaaacca ccctggcgcc caatacgcaa accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca
     2281 ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat
     2341 taatgtaagt tagctcactc attaggcacc gggatctcga ccgatgccct tgagagcctt
     2401 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact agcatgatcg tgctcctgtc
     2461 gttgaggacc cggctaggct ggcggggttg ccttactggt tagcagaatg aatcaccgat
     2521 acgcgagcga acgtgaagcg actgctgctg caaaacgtct gcgacctgag caacaacatg
     2581 aatggtcttc ggtttccgtg tttcgtaaag tctggaaacg cggaagtcag cgccctgcac
     2641 cattatgttc cggatctgca tcgcaggatg ctgctggcta ccctgtggaa cacctacatc
     2701 tgtattaacg aagcgctggc attgaccctg agtgattttt ctctggtccc gccgcatcca
     2761 taccgccagt tgtttaccct cacaacgttc cagtaaccgg gcatgttcat catcagtaac
     2821 ccgtatcgtg agcatcctct ctcgtttcat cggtatcatt acccccatga acagaaatcc
     2881 cccttacacg gaggcatcag tgaccaaaca ggaaaaaacc gcccttaaca tggcccgctt
     2941 tatcagaagc cagacattaa cgcttctgga gaaactcaac gagctggacg cggatgaaca
     3001 ggcagacatc tgtgaatcgc ttcacgacca cgctgatgag ctttaccgca gctgcctcgc
     3061 gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc
     3121 ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg
     3181 cgggtgtcgg ggcgcagcca tgacccagtc acgtagcgat agcggagtgt atactggctt
     3241 aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatatgcgg tgtgaaatac
     3301 cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca tcaggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
     3361 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
     3421 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
     3481 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
     3541 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
     3601 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
     3661 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
     3721 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
     3781 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
     3841 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
     3901 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
     3961 ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
     4021 gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
     4081 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
     4141 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgaacaat aaaactgtct
     4201 gcttacataa acagtaatac aaggggtgtt atgagccata ttcaacggga aacgtcttgc
     4261 tctaggccgc gattaaattc caacatggat gctgatttat atgggtataa atgggctcgc
     4321 gataatgtcg ggcaatcagg tgcgacaatc tatcgattgt atgggaagcc cgatgcgcca
     4381 gagttgtttc tgaaacatgg caaaggtagc gttgccaatg atgttacaga tgagatggtc
     4441 agactaaact ggctgacgga atttatgcct cttccgacca tcaagcattt tatccgtact
     4501 cctgatgatg catggttact caccactgcg atccccggca aaacagcatt ccaggtatta
     4561 gaagaatatc ctgattcagg tgaaaatatt gttgatgcgc tggcagtgtt cctgcgccgg
     4621 ttgcattcga ttcctgtttg taattgtcct tttaacagtg atcgcgtatt tcgtctcgct
     4681 caggcgcaat cacgaatgaa taacggtttg gttgatgcga gtgattttga tgacgagcgt
     4741 aatggctggc ctgttgaaca agtctggaaa gaaatgcata aacttttgcc attctcaccg
     4801 gattcagtcg tcactcatgg tgatttctca cttgataacc ttatttttga cgaggggaaa
     4861 ttaataggtt gtattgatgt tggacgagtc ggaatcgcag accgatacca ggatcttgcc
     4921 atcctatgga actgcctcgg tgagttttct ccttcattac agaaacggct ttttcaaaaa
     4981 tatggtattg ataatcctga tatgaataaa ttgcagtttc atttgatgct cgatgagttt
     5041 ttctaagaat taattcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat
     5101 aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgaa attgtaaacg ttaatatttt
     5161 gttaaaattc gcgttaaatt tttgttaaat cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat
     5221 cggcaaaatc ccttataaat caaaagaata gaccgagata gggttgagtg ttgttccagt
     5281 ttggaacaag agtccactat taaagaacgt ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt
     5341 ctatcagggc gatggcccac tacgtgaacc atcaccctaa tcaagttttt tggggtcgag
     5401 gtgccgtaaa gcactaaatc ggaaccctaa agggagcccc cgatttagag cttgacgggg
     5461 aaagccggcg aacgtggcga gaaaggaagg gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc
     5521 gctggcaagt gtagcggtca cgctgcgcgt aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc
     5581 gctacagggc gcgtcccatt cgcca
//

pET48b载体质粒图谱pdf版和相关资料下载

pET48b载体应用举例

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