| 出品公司: | EMD Biosciences (Novagen) |
|---|---|
| 别名: | pET48b, pET 48b |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达 |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5605 bp |
| 5' 测序引物序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; Trx-F: 5'-TTCCTCGACGCTAACCTG-3' |
| 3' 测序引物序列: | T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
| 载体标签: | N-Trx, N-His,N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin |
| 载体抗性: | 卡那 |
| 表达宿主菌: | Rosetta-gami2 、 Rosetta-gami2(DE3) |
| 备注: |
与pET47系列载体相同，但多了Trx标签。; 含有HRV 3C蛋白酶切位点，可以在低温下将融合标签切除。含有C端Thrombin蛋白酶切位点。
|
| 产品目录号: | 71462-3 |
| 稳定性: | 瞬时表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
| 表达宿主菌2: | BL21(DE3) 、BLR(DE3)、Rosetta(DE3)、OrigamiB(DE3) |
| pET表达手册： |
pET表达手册英文版 pET表达手册中文版 |
| pET载体汇总: |
pET-3a pET-11a pET-12a pET-14b pET-15b pET-16b pET-17b pET-19b pET-20b pET-21a pET-22b pET-23a pET-24a pET-25b pET-26b pET-27b pET-28a pET-29a pET-30a pET-31b pET-32a pET-33b pET-34b pET-35b pET-37b pET-39b pET-40b pET-41a pET-42a pET-43.1a pET-44a pET-45b pET-47b pET-48b pET-49b pET-50b pET-51b pET-52b pETDuet-1 pACYCDuet-1 pCDFDuet-1 pRSFDuet-1 pColaDuet-1 |
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pET-48b(+)载体 pET48b质粒基本信息
pET-48b(+)质粒图谱 pET48b载体图谱和pET-48b(+)载体序列 pET48b质粒序列多克隆位点信息
pET-48b(+)质粒 pET48b载体简介
pET-48b载体含有N端Trx和His标签，在标签后面紧跟着的是HRV 3C蛋白酶切位点。HRV 3C蛋白酶能够高特异性的识别LEVLFQ↓GP蛋白序列，能够在低温下高效切割掉融合标签序列。pET-48b载体还含有一个可选择的C端Thrombin蛋白酶切位点，紧接着位点后是S标签。
pET48b载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
载体的单链测序应该使用S 18引物(Cat. No. 71262-3)。
pET-48b(+)质粒序列 pET48b载体序列
LOCUS pET-48b(+) 5605 bp DNA circular 11-SEP-2008
DEFINITION pET-48b(+).
SOURCE
ORGANISM
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http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
rep_origin complement(5146..5593)
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primer complement(374..421)
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BASE COUNT 1355 a 1434 c 1492 g 1324 t
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc
181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct
241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc
301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg atggtgatga
361 ccagaaccac tagatggagt aggagtagga ggattgttat tagaaccgcc accaccacta
421 gtatggccag aaccagaacc ggccaggtta gcgtcgagga actctttcaa ctgaccttta
481 gacagtgcac ccactttggt tgccgccact tcaccgtttt tgaacagcag cagagtcggg
541 ataccacgga tgccatattt cggcgcagtg ccagggtttt gatcgatgtt cagttttgca
601 acggtcagtt tgccctgata ttcgtcagcg atttcatcca gaatcggggc gatcattttg
661 cacggaccgc accactctgc ccagaaatcg acgaggatcg ccccgtccgc tttgagtaca
721 tccgtgtcaa aactgtcgtc agtcaggtga ataattttat cgctcatatg tatatctcct
781 tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac aattccccta
841 tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatcgatctc gatcctctac gccggacgca
901 tcgtggccgg catcaccggc gccacaggtg cggttgctgg cgcctatatc gccgacatca
961 ccgatgggga agatcgggct cgccacttcg ggctcatgag cgcttgtttc ggcgtgggta
1021 tggtggcagg ccccgtggcc gggggactgt tgggcgccat ctccttgcat gcaccattcc
1081 ttgcggcggc ggtgctcaac ggcctcaacc tactactggg ctgcttccta atgcaggagt
1141 cgcataaggg agagcgtcga gatcccggac accatcgaat ggcgcaaaac ctttcgcggt
1201 atggcatgat agcgcccgga agagagtcaa ttcagggtgg tgaatgtgaa accagtaacg
1261 ttatacgatg tcgcagagta tgccggtgtc tcttatcaga ccgtttcccg cgtggtgaac
1321 caggccagcc acgtttctgc gaaaacgcgg gaaaaagtgg aagcggcgat ggcggagctg
1381 aattacattc ccaaccgcgt ggcacaacaa ctggcgggca aacagtcgtt gctgattggc
1441 gttgccacct ccagtctggc cctgcacgcg ccgtcgcaaa ttgtcgcggc gattaaatct
1501 cgcgccgatc aactgggtgc cagcgtggtg gtgtcgatgg tagaacgaag cggcgtcgaa
1561 gcctgtaaag cggcggtgca caatcttctc gcgcaacgcg tcagtgggct gatcattaac
1621 tatccgctgg atgaccagga tgccattgct gtggaagctg cctgcactaa tgttccggcg
1681 ttatttcttg atgtctctga ccagacaccc atcaacagta ttattttctc ccatgaagac
1741 ggtacgcgac tgggcgtgga gcatctggtc gcattgggtc accagcaaat cgcgctgtta
1801 gcgggcccat taagttctgt ctcggcgcgt ctgcgtctgg ctggctggca taaatatctc
1861 actcgcaatc aaattcagcc gatagcggaa cgggaaggcg actggagtgc catgtccggt
1921 tttcaacaaa ccatgcaaat gctgaatgag ggcatcgttc ccactgcgat gctggttgcc
1981 aacgatcaga tggcgctggg cgcaatgcgc gccattaccg agtccgggct gcgcgttggt
2041 gcggacatct cggtagtggg atacgacgat accgaagaca gctcatgtta tatcccgccg
2101 ttaaccacca tcaaacagga ttttcgcctg ctggggcaaa ccagcgtgga ccgcttgctg
2161 caactctctc agggccaggc ggtgaagggc aatcagctgt tgcccgtctc actggtgaaa
2221 agaaaaacca ccctggcgcc caatacgcaa accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca
2281 ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat
2341 taatgtaagt tagctcactc attaggcacc gggatctcga ccgatgccct tgagagcctt
2401 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact agcatgatcg tgctcctgtc
2461 gttgaggacc cggctaggct ggcggggttg ccttactggt tagcagaatg aatcaccgat
2521 acgcgagcga acgtgaagcg actgctgctg caaaacgtct gcgacctgag caacaacatg
2581 aatggtcttc ggtttccgtg tttcgtaaag tctggaaacg cggaagtcag cgccctgcac
2641 cattatgttc cggatctgca tcgcaggatg ctgctggcta ccctgtggaa cacctacatc
2701 tgtattaacg aagcgctggc attgaccctg agtgattttt ctctggtccc gccgcatcca
2761 taccgccagt tgtttaccct cacaacgttc cagtaaccgg gcatgttcat catcagtaac
2821 ccgtatcgtg agcatcctct ctcgtttcat cggtatcatt acccccatga acagaaatcc
2881 cccttacacg gaggcatcag tgaccaaaca ggaaaaaacc gcccttaaca tggcccgctt
2941 tatcagaagc cagacattaa cgcttctgga gaaactcaac gagctggacg cggatgaaca
3001 ggcagacatc tgtgaatcgc ttcacgacca cgctgatgag ctttaccgca gctgcctcgc
3061 gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc
3121 ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg
3181 cgggtgtcgg ggcgcagcca tgacccagtc acgtagcgat agcggagtgt atactggctt
3241 aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatatgcgg tgtgaaatac
3301 cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca tcaggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
3361 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
3421 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
3481 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
3541 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
3601 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
3661 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
3721 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
3781 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
3841 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
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3961 ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
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4321 gataatgtcg ggcaatcagg tgcgacaatc tatcgattgt atgggaagcc cgatgcgcca
4381 gagttgtttc tgaaacatgg caaaggtagc gttgccaatg atgttacaga tgagatggtc
4441 agactaaact ggctgacgga atttatgcct cttccgacca tcaagcattt tatccgtact
4501 cctgatgatg catggttact caccactgcg atccccggca aaacagcatt ccaggtatta
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4921 atcctatgga actgcctcgg tgagttttct ccttcattac agaaacggct ttttcaaaaa
4981 tatggtattg ataatcctga tatgaataaa ttgcagtttc atttgatgct cgatgagttt
5041 ttctaagaat taattcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat
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//
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