| 出品公司: | EMD Biosciences(Novagen) |
|---|---|
| 别名: | pET32a, pet 32a |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达 |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 5900bp |
| 5' 测序引物: | T7： 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 3' 测序引物: | T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
| 载体标签: | thioredoxin (N端); His (中间和C端) |
| 载体抗性: | 氨苄 |
| 备注: |
pET32a载体用于表达可溶性，具有活性功能的蛋白;pET-32a(+)载体具有N端Thrombin（凝血酶）酶切位点，N端肠激酶酶切位点。pET32啊，pET32b，pET32c载体的差异主要是在于多克隆位点，其他地方完全一致。 |
| 产品货号: | 69015-3 |
| 稳定性: | 瞬时表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
| 表达宿主菌: | BL21(DE3) 、BLR(DE3)、Rosetta(DE3)、OrigamiB(DE3) |
| pET表达手册： |
pET表达手册英文版 pET表达手册中文版 |
| pET载体汇总: |
pET-3a pET-11a pET-12a pET-14b pET-15b pET-16b pET-17b pET-19b pET-20b pET-21a pET-22b pET-23a pET-24a pET-25b pET-26b pET-27b pET-28a pET-29a pET-30a pET-31b pET-32a pET-33b pET-34b pET-35b pET-37b pET-39b pET-40b pET-41a pET-42a pET-43.1a pET-44a pET-45b pET-47b pET-48b pET-49b pET-50b pET-51b pET-52b pETDuet-1 pACYCDuet-1 pCDFDuet-1 pRSFDuet-1 pColaDuet-1 |
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pet32a载体基本信息
pet32a载体图谱质粒图谱和多克隆位点信息
pet32a载体简介
pET32系列载体是设计用来克隆构建和高水平融合表达表达带有109个氨基酸Trx标签的蛋白质序列。将基因插入到载体的多克隆位点，能够获得融合表达蛋白质。同时融合蛋白包含有His标签和S标签，这些可以用于蛋白表达检测和纯化过程。 载体的多克隆位点见上面的图谱。需要注意的是图谱中的核苷酸编码顺序是以pBR322载体的复制方向为正方向，所以T7表达区域在图谱中是处于反向的位置。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pet32a载体序列
LOCUS pET-32a(+) 5900 bp DNA circular 11-SEP-2008
SOURCE
ORGANISM
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
promoter complement(764..780)
/vntifkey="30"
/label=T7\promoter
misc_signal complement(366..692)
/vntifkey="87"
/label=trx\tag
protein_bind complement(327..344)
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/label=His\tag
misc_feature complement(249..293)
/vntifkey="21"
/label=S\tag
protein_bind 140..157
/vntifkey="31"
/label=His\tag
terminator complement(26..72)
/vntifkey="43"
/label=T7\terminator
CDS 1171..2250
/vntifkey="4"
/label=lac\I
rep_origin complement(3684..3684)
/vntifkey="33"
/label=ColE1\pBR322\origin
CDS complement(4445..5302)
/vntifkey="4"
/label=bla\(amp)\sequence
rep_origin complement(5434..5889)
/vntifkey="33"
/label=f1\origin
CDS complement(737..761)
/vntifkey="4"
/label=lac\operator
protein_bind complement(219..233)
/vntifkey="31"
/label=enterokinase
protein_bind complement(300..317)
/vntifkey="31"
/label=thrombin
BASE COUNT 1391 a 1564 c 1560 g 1385 t
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccgatatca gccatggcct tgtcgtcgtc gtcggtaccc
241 agatctgggc tgtccatgtg ctggcgttcg aatttagcag cagcggtttc tttcatacca
301 gaaccgcgtg gcaccagacc agaagaatga tgatgatgat ggtgcatatg gccagaacca
361 gaaccggcca ggttagcgtc gaggaactct ttcaactgac ctttagacag tgcacccact
421 ttggttgccg ccacttcacc gtttttgaac agcagcagag tcgggatacc acggatgcca
481 tatttcggcg cagtgccagg gttttgatcg atgttcagtt ttgcaacggt cagtttgccc
541 tgatattcgt cagcgatttc atccagaatc ggggcgatca ttttgcacgg accgcaccac
601 tctgcccaga aatcgacgag gatcgccccg tccgctttga gtacatccgt gtcaaaactg
661 tcgtcagtca ggtgaataat tttatcgctc atatgtatat ctccttctta aagttaaaca
721 aaattatttc tagaggggaa ttgttatccg ctcacaattc ccctatagtg agtcgtatta
781 atttcgcggg atcgagatcg atctcgatcc tctacgccgg acgcatcgtg gccggcatca
841 ccggcgccac aggtgcggtt gctggcgcct atatcgccga catcaccgat ggggaagatc
901 gggctcgcca cttcgggctc atgagcgctt gtttcggcgt gggtatggtg gcaggccccg
961 tggccggggg actgttgggc gccatctcct tgcatgcacc attccttgcg gcggcggtgc
1021 tcaacggcct caacctacta ctgggctgct tcctaatgca ggagtcgcat aagggagagc
1081 gtcgagatcc cggacaccat cgaatggcgc aaaacctttc gcggtatggc atgatagcgc
1141 ccggaagaga gtcaattcag ggtggtgaat gtgaaaccag taacgttata cgatgtcgca
1201 gagtatgccg gtgtctctta tcagaccgtt tcccgcgtgg tgaaccaggc cagccacgtt
1261 tctgcgaaaa cgcgggaaaa agtggaagcg gcgatggcgg agctgaatta cattcccaac
1321 cgcgtggcac aacaactggc gggcaaacag tcgttgctga ttggcgttgc cacctccagt
1381 ctggccctgc acgcgccgtc gcaaattgtc gcggcgatta aatctcgcgc cgatcaactg
1441 ggtgccagcg tggtggtgtc gatggtagaa cgaagcggcg tcgaagcctg taaagcggcg
1501 gtgcacaatc ttctcgcgca acgcgtcagt gggctgatca ttaactatcc gctggatgac
1561 caggatgcca ttgctgtgga agctgcctgc actaatgttc cggcgttatt tcttgatgtc
1621 tctgaccaga cacccatcaa cagtattatt ttctcccatg aagacggtac gcgactgggc
1681 gtggagcatc tggtcgcatt gggtcaccag caaatcgcgc tgttagcggg cccattaagt
1741 tctgtctcgg cgcgtctgcg tctggctggc tggcataaat atctcactcg caatcaaatt
1801 cagccgatag cggaacggga aggcgactgg agtgccatgt ccggttttca acaaaccatg
1861 caaatgctga atgagggcat cgttcccact gcgatgctgg ttgccaacga tcagatggcg
1921 ctgggcgcaa tgcgcgccat taccgagtcc gggctgcgcg ttggtgcgga catctcggta
1981 gtgggatacg acgataccga agacagctca tgttatatcc cgccgttaac caccatcaaa
2041 caggattttc gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct tgctgcaact ctctcagggc
2101 caggcggtga agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg tgaaaagaaa aaccaccctg
2161 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
2221 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaatg taagttagct
2281 cactcattag gcaccgggat ctcgaccgat gcccttgaga gccttcaacc cagtcagctc
2341 cttccggtgg gcgcggggca tgactatcgt cgccgcactt atgactgtct tctttatcat
2401 gcaactcgta ggacaggtgc cggcagcgct ctgggtcatt ttcggcgagg accgctttcg
2461 ctggagcgcg acgatgatcg gcctgtcgct tgcggtattc ggaatcttgc acgccctcgc
2521 tcaagccttc gtcactggtc ccgccaccaa acgtttcggc gagaagcagg ccattatcgc
2581 cggcatggcg gccccacggg tgcgcatgat cgtgctcctg tcgttgagga cccggctagg
2641 ctggcggggt tgccttactg gttagcagaa tgaatcaccg atacgcgagc gaacgtgaag
2701 cgactgctgc tgcaaaacgt ctgcgacctg agcaacaaca tgaatggtct tcggtttccg
2761 tgtttcgtaa agtctggaaa cgcggaagtc agcgccctgc accattatgt tccggatctg
2821 catcgcagga tgctgctggc taccctgtgg aacacctaca tctgtattaa cgaagcgctg
2881 gcattgaccc tgagtgattt ttctctggtc ccgccgcatc cataccgcca gttgtttacc
2941 ctcacaacgt tccagtaacc gggcatgttc atcatcagta acccgtatcg tgagcatcct
3001 ctctcgtttc atcggtatca ttacccccat gaacagaaat cccccttaca cggaggcatc
3061 agtgaccaaa caggaaaaaa ccgcccttaa catggcccgc tttatcagaa gccagacatt
3121 aacgcttctg gagaaactca acgagctgga cgcggatgaa caggcagaca tctgtgaatc
3181 gcttcacgac cacgctgatg agctttaccg cagctgcctc gcgcgtttcg gtgatgacgg
3241 tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca gcttgtctgt aagcggatgc
3301 cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt ggcgggtgtc ggggcgcagc
3361 catgacccag tcacgtagcg atagcggagt gtatactggc ttaactatgc ggcatcagag
3421 cagattgtac tgagagtgca ccatatatgc ggtgtgaaat accgcacaga tgcgtaagga
3481 gaaaataccg catcaggcgc tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg
3541 ttcggctgcg gcgagcggta tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat
3601 caggggataa cgcaggaaag aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta
3661 aaaaggccgc gttgctggcg tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa
3721 atcgacgctc aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc
3781 cccctggaag ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt
3841 ccgcctttct cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca
3901 gttcggtgta ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg
3961 accgctgcgc cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat
4021 cgccactggc agcagccact ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta
4081 cagagttctt gaagtggtgg cctaactacg gctacactag aaggacagta tttggtatct
4141 gcgctctgct gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac
4201 aaaccaccgc tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa
4261 aaggatctca agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa
4321 actcacgtta agggattttg gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt
4381 taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca
4441 gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca
4501 tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc
4561 ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa
4621 accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc
4681 agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca
4741 acgttgttgc cattgctgca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat
4801 tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag
4861 cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac
4921 tcatggttat ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt
4981 ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt
5041 gctcttgccc ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc
5101 tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat
5161 ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca
5221 gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga
5281 cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg
5341 gttattgtct catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg
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5521 aaatccctta taaatcaaaa gaatagaccg agatagggtt gagtgttgtt ccagtttgga
5581 acaagagtcc actattaaag aacgtggact ccaacgtcaa agggcgaaaa accgtctatc
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5761 cggcgaacgt ggcgagaaag gaagggaaga aagcgaaagg agcgggcgct agggcgctgg
5821 caagtgtagc ggtcacgctg cgcgtaacca ccacacccgc cgcgcttaat gcgccgctac
5881 agggcgcgtc ccattcgcca
//
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