pET-28b(+)

价格:800元

联系方式:I47-825O-882O

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pET28b载体基本信息

出品公司: EMD Biosciences (Novagen)
别名: pET28b, pet 28b, pET-28(+)
质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达
表达水平:
克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小: 5368 bp
5' 测序引物: T7
5' 测序引物序列:   5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
载体标签: N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His
载体抗性: 卡那霉素
表达宿主菌: BL21(DE3) BLR(DE3)BL21(DE3)pLysS
备注: 载体带有N端凝血酶蛋白酶切位点; pET28a, b, c的差异主要是在多克隆位点;
产品目录号: 69865-3
稳定性: 瞬时表达
组成型: 组成型
病毒/非病毒: 非病毒

pET28b载体质粒图谱和多克隆位点信息

pet28b载体图谱
pet28c多克隆位点

pET28b载体简介

pET-28b载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签,同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28b载体的单一的 多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。

T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。

pET28b载体序列

LOCUS       pET-28 b (+)    5368 bp     DNA  Circular   SYN
DEFINITION  pET-28 b (+)
ACCESSION   
KEYWORDS    
SOURCE      
  ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT     This file is created by Vector NTI
            http://www.biofeng.com/
COMMENT     ORIGDB|GenBank
COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..5368
                     /organism="pET-28 b (+)"
                     /mol_type="other DNA"
     terminator      complement(1..129)
                     /label="T7_terminator"
     misc_feature    69..87
                     /label="T7_Terminal_primer"
     misc_feature    complement(206..238)
                     /label="T7_leader"
     misc_feature    complement(221..239)
                     /label="Xpress_fwd_primer"
     misc_feature    complement(306..322)
                     /label="T7_transl_en_RBS"
     misc_feature    complement(340..367)
                     /label="lacO"
     promoter        complement(367..385)
                     /label="T7_promoter"
     gene            417..680
                     /label="tet (300 - 563)"
                     /gene="tet (300 - 563)"
     misc_feature    complement(469..488)
                     /label="pBRrevBam_primer"
     CDS             522..1022
                     /label="ORF frame 3"
     misc_feature    763..1854
                     /label="lacI"
     CDS             895..1854
                     /label="ORF frame 1"
     gene            1913..2188
                     /label="tet (576 - 851)"
                     /gene="tet (576 - 851)"
     misc_feature    2663..2854
                     /label="ROP"
     misc_feature    complement(2848..2870)
                     /label="pGEX_3_primer"
     rep_origin      complement(3269..3888)
                     /label="pBR322_origin"
     gene            3994..4809
                     /label="KanR2"
                     /gene="KanR2"
     CDS             3994..4809
                     /label="ORF frame 1"
ORIGIN
    1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
   61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
  121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
  181 cgacggagct cgaattcgga tcccgaccca tttgctgtcc accagtcatg ctagccatat
  241 ggctgccgcg cggcaccagg ccgctgctgt gatgatgatg atgatggctg ctgcccatgg
  301 tatatctcct tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac
  361 aattccccta tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatctcgatc ctctacgccg
  421 gacgcatcgt ggccggcatc accggcgcca caggtgcggt tgctggcgcc tatatcgccg
  481 acatcaccga tggggaagat cgggctcgcc acttcgggct catgagcgct tgtttcggcg
  541 tgggtatggt ggcaggcccc gtggccgggg gactgttggg cgccatctcc ttgcatgcac
  601 cattccttgc ggcggcggtg ctcaacggcc tcaacctact actgggctgc ttcctaatgc
  661 aggagtcgca taagggagag cgtcgagatc ccggacacca tcgaatggcg caaaaccttt
  721 cgcggtatgg catgatagcg cccggaagag agtcaattca gggtggtgaa tgtgaaacca
  781 gtaacgttat acgatgtcgc agagtatgcc ggtgtctctt atcagaccgt ttcccgcgtg
  841 gtgaaccagg ccagccacgt ttctgcgaaa acgcgggaaa aagtggaagc ggcgatggcg
  901 gagctgaatt acattcccaa ccgcgtggca caacaactgg cgggcaaaca gtcgttgctg
  961 attggcgttg ccacctccag tctggccctg cacgcgccgt cgcaaattgt cgcggcgatt
 1021 aaatctcgcg ccgatcaact gggtgccagc gtggtggtgt cgatggtaga acgaagcggc
 1081 gtcgaagcct gtaaagcggc ggtgcacaat cttctcgcgc aacgcgtcag tgggctgatc
 1141 attaactatc cgctggatga ccaggatgcc attgctgtgg aagctgcctg cactaatgtt
 1201 ccggcgttat ttcttgatgt ctctgaccag acacccatca acagtattat tttctcccat
 1261 gaagacggta cgcgactggg cgtggagcat ctggtcgcat tgggtcacca gcaaatcgcg
 1321 ctgttagcgg gcccattaag ttctgtctcg gcgcgtctgc gtctggctgg ctggcataaa
 1381 tatctcactc gcaatcaaat tcagccgata gcggaacggg aaggcgactg gagtgccatg
 1441 tccggttttc aacaaaccat gcaaatgctg aatgagggca tcgttcccac tgcgatgctg
 1501 gttgccaacg atcagatggc gctgggcgca atgcgcgcca ttaccgagtc cgggctgcgc
 1561 gttggtgcgg atatctcggt agtgggatac gacgataccg aagacagctc atgttatatc
 1621 ccgccgttaa ccaccatcaa acaggatttt cgcctgctgg ggcaaaccag cgtggaccgc
 1681 ttgctgcaac tctctcaggg ccaggcggtg aagggcaatc agctgttgcc cgtctcactg
 1741 gtgaaaagaa aaaccaccct ggcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc
 1801 gattcattaa tgcagctggc acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa
 1861 cgcaattaat gtaagttagc tcactcatta ggcaccggga tctcgaccga tgcccttgag
 1921 agccttcaac ccagtcagct ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact
 1981 tatgactgtc ttctttatca tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tctgggtcat
 2041 tttcggcgag gaccgctttc gctggagcgc gacgatgatc ggcctgtcgc ttgcggtatt
 2101 cggaatcttg cacgccctcg ctcaagcctt cgtcactggt cccgccacca aacgtttcgg
 2161 cgagaagcag gccattatcg ccggcatggc ggccccacgg gtgcgcatga tcgtgctcct
 2221 gtcgttgagg acccggctag gctggcgggg ttgccttact ggttagcaga atgaatcacc
 2281 gatacgcgag cgaacgtgaa gcgactgctg ctgcaaaacg tctgcgacct gagcaacaac
 2341 atgaatggtc ttcggtttcc gtgtttcgta aagtctggaa acgcggaagt cagcgccctg
 2401 caccattatg ttccggatct gcatcgcagg atgctgctgg ctaccctgtg gaacacctac
 2461 atctgtatta acgaagcgct ggcattgacc ctgagtgatt tttctctggt cccgccgcat
 2521 ccataccgcc agttgtttac cctcacaacg ttccagtaac cgggcatgtt catcatcagt
 2581 aacccgtatc gtgagcatcc tctctcgttt catcggtatc attaccccca tgaacagaaa
 2641 tcccccttac acggaggcat cagtgaccaa acaggaaaaa accgccctta acatggcccg
 2701 ctttatcaga agccagacat taacgcttct ggagaaactc aacgagctgg acgcggatga
 2761 acaggcagac atctgtgaat cgcttcacga ccacgctgat gagctttacc gcagctgcct
 2821 cgcgcgtttc ggtgatgacg gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac
 2881 agcttgtctg taagcggatg ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt
 2941 tggcgggtgt cggggcgcag ccatgaccca gtcacgtagc gatagcggag tgtatactgg
 3001 cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatatg cggtgtgaaa
 3061 taccgcacag atgcgtaagg agaaaatacc gcatcaggcg ctcttccgct tcctcgctca
 3121 ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg
 3181 taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc
 3241 agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc
 3301 cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac
 3361 tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc
 3421 tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata
 3481 gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc
 3541 acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca
 3601 acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag
 3661 cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta
 3721 gaaggacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg
 3781 gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc
 3841 agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt
 3901 ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaac aataaaactg
 3961 tctgcttaca taaacagtaa tacaaggggt gttatgagcc atattcaacg ggaaacgtct
 4021 tgctctaggc cgcgattaaa ttccaacatg gatgctgatt tatatgggta taaatgggct
 4081 cgcgataatg tcgggcaatc aggtgcgaca atctatcgat tgtatgggaa gcccgatgcg
 4141 ccagagttgt ttctgaaaca tggcaaaggt agcgttgcca atgatgttac agatgagatg
 4201 gtcagactaa actggctgac ggaatttatg cctcttccga ccatcaagca ttttatccgt
 4261 actcctgatg atgcatggtt actcaccact gcgatccccg ggaaaacagc attccaggta
 4321 ttagaagaat atcctgattc aggtgaaaat attgttgatg cgctggcagt gttcctgcgc
 4381 cggttgcatt cgattcctgt ttgtaattgt ccttttaaca gcgatcgcgt atttcgtctc
 4441 gctcaggcgc aatcacgaat gaataacggt ttggttgatg cgagtgattt tgatgacgag
 4501 cgtaatggct ggcctgttga acaagtctgg aaagaaatgc ataaactttt gccattctca
 4561 ccggattcag tcgtcactca tggtgatttc tcacttgata accttatttt tgacgagggg
 4621 aaattaatag gttgtattga tgttggacga gtcggaatcg cagaccgata ccaggatctt
 4681 gccatcctat ggaactgcct cggtgagttt tctccttcat tacagaaacg gctttttcaa
 4741 aaatatggta ttgataatcc tgatatgaat aaattgcagt ttcatttgat gctcgatgag
 4801 tttttctaag aattaattca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga aaaataaaca
 4861 aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gaaattgtaa acgttaatat
 4921 tttgttaaaa ttcgcgttaa atttttgtta aatcagctca ttttttaacc aataggccga
 4981 aatcggcaaa atcccttata aatcaaaaga atagaccgag atagggttga gtgttgttcc
 5041 agtttggaac aagagtccac tattaaagaa cgtggactcc aacgtcaaag ggcgaaaaac
 5101 cgtctatcag ggcgatggcc cactacgtga accatcaccc taatcaagtt ttttggggtc
 5161 gaggtgccgt aaagcactaa atcggaaccc taaagggagc ccccgattta gagcttgacg
 5221 gggaaagccg gcgaacgtgg cgagaaagga agggaagaaa gcgaaaggag cgggcgctag
 5281 ggcgctggca agtgtagcgg tcacgctgcg cgtaaccacc acacccgccg cgcttaatgc
 5341 gccgctacag ggcgcgtccc attcgcca
//

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pET28b载体应用举例

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