pTrcHis B

价格:1000元

联系方式:I47-825O-882O

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pTrcHisB载体基本信息

出品公司: Invitrogen
别名: pTrcHisB, pTrcHis B
质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达载体
表达水平: 高拷贝
启动子: Trc
克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
载体大小: 4404 bp
5' 测序引物及序列: pTrcHis-F: gaggtatatattaatgtatcg
3' 测序引物及序列: pTrcHis-R: GATTTAATCTGTATCAGG
载体标签: N-His, N-EK
载体抗性: Ampicillin
备注:
 
产品目录号: V360-20
稳定性: 瞬时表达 Transient
组成型: 组成型 Constitutive
病毒/非病毒: 非病毒

pTrcHisB载体质粒图谱和多克隆位点信息

pTrcHisB载体图谱

pTrcHisB载体多克隆位点

pTrcHisB载体简介

pTrcHis载体是来由pBR322质粒衍生而来的表达载体,设计用来在大肠杆菌中进行重组蛋白的高效表达和纯化。

载体上的Trc启动子和rrnB抗终止区使得高水平蛋白表达成为可能.Trc启动子由Trp启动子的-35区域和Lac启动子的-10区域共同组成。pTrcHis载体同时包含有一个LacIq基因,该基因编码了Lac启动子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+还是LacIq-都可以高效抑制插入基因的转录。

进行蛋白表达时,大肠杆菌需要生长到对数生长期,然后加入1mM IPTG,去除阻遏蛋白,诱导表达。载体上的迷你顺反子结构能够增强插入基因的转录水平,从而高水平表达目的蛋白。DNA插入片段位于载体表达片段下游,在其上游有一个N-端融合表达多肽序列,该序列包含有ATG起始密码子,6xHis标签,T7噬菌体10号基因的翻译增强子,X press抗原表位,肠激酶酶切识别位点。

pTrcHisB载体序列

LOCUS       pTrcHis\B    4404 bp     DNA   circular    SYN
DEFINITION  pTRCHISB
ACCESSION   
KEYWORDS    
SOURCE      
  ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT     This file is created by Vector NTI
            http://www.biofeng.com/
COMMENT     ORIGDB|GenBank
COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4404
                     /organism="pTRCHISB"
                     /mol_type="other DNA"
     misc_feature    235..257
                     /label="M13_pUC_rev_primer"
     misc_feature    264..333
                     /label="rrnB_ATS"
     misc_feature    370..390
                     /label="pTrcHis_fwd_primer"
     misc_feature    383..409
                     /label="minicis"
     misc_feature    445..463
                     /label="Xpress_fwd_primer"
     misc_feature    446..478
                     /label="T7_leader"
     misc_feature    482..505
                     /label="Xpress_EK"
     misc_feature    complement(587..604)
                     /label="pTrcHis_rev_primer"
     misc_feature    complement(587..604)
                     /label="pBAD_rev_primer"
     terminator      637..794
                     /label="rrnB_terminator"
     terminator      760..803
                     /label="rrnB_T1_terminator"
     terminator      935..962
                     /label="rrnB_T2_terminator"
     promoter        1004..1032
                     /label="AmpR_promoter"
     gene            1074..1934
                     /label="Ampicillin"
                     /gene="Ampicillin"
     CDS             1074..1934
                     /label="ORF frame 3"
     rep_origin      2089..2708
                     /label="pBR322_origin"
     misc_feature    3105..3127
                     /label="pGEX_3_primer"
     misc_feature    3274..4365
                     /label="lacI"
     CDS             3406..4365
                     /label="ORF frame 1"
ORIGIN
    1 gtttgacagc ttatcatcga ctgcacggtg caccaatgct tctggcgtca ggcagccatc
   61 ggaagctgtg gtatggctgt gcaggtcgta aatcactgca taattcgtgt cgctcaaggc
  121 gcactcccgt tctggataat gttttttgcg ccgacatcat aacggttctg gcaaatattc
  181 tgaaatgagc tgttgacaat taatcatccg gctcgtataa tgtgtggaat tgtgagcgga
  241 taacaatttc acacaggaaa cagcgccgct gagaaaaagc gaagcggcac tgctctttaa
  301 caatttatca gacaatctgt gtgggcactc gaccggaatt atcgattaac tttattatta
  361 aaaattaaag aggtatatat taatgtatcg attaaataag gaggaataaa ccatgggggg
  421 ttctcatcat catcatcatc atggtatggc tagcatgact ggtggacagc aaatgggtcg
  481 ggatctgtac gacgatgacg ataaggatcc gagctcgaga tctgcagctg gtaccatatg
  541 ggaattcgaa gcttggctgt tttggcggat gagagaagat tttcagcctg atacagatta
  601 aatcagaacg cagaagcggt ctgataaaac agaatttgcc tggcggcagt agcgcggtgg
  661 tcccacctga ccccatgccg aactcagaag tgaaacgccg tagcgccgat ggtagtgtgg
  721 ggtctcccca tgcgagagta gggaactgcc aggcatcaaa taaaacgaaa ggctcagtcg
  781 aaagactggg cctttcgttt tatctgttgt ttgtcggtga acgctctcct gagtaggaca
  841 aatccgccgg gagcggattt gaacgttgcg aagcaacggc ccggagggtg gcgggcagga
  901 cgcccgccat aaactgccag gcatcaaatt aagcagaagg ccatcctgac ggatggcctt
  961 tttgcgtttc tacaaactct ttttgtttat ttttctaaat acattcaaat atgtatccgc
 1021 tcatgagaca ataaccctga taaatgcttc aataatattg aaaaaggaag agtatgagta
 1081 ttcaacattt ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc attttgcctt cctgtttttg
 1141 ctcacccaga aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga tcagttgggt gcacgagtgg
 1201 gttacatcga actggatctc aacagcggta agatccttga gagttttcgc cccgaagaac
 1261 gttttccaat gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg cgcggtatta tcccgtgttg
 1321 acgccgggca agagcaactc ggtcgccgca tacactattc tcagaatgac ttggttgagt
 1381 actcaccagt cacagaaaag catcttacgg atggcatgac agtaagagaa ttatgcagtg
 1441 ctgccataac catgagtgat aacactgcgg ccaacttact tctgacaacg atcggaggac
 1501 cgaaggagct aaccgctttt ttgcacaaca tgggggatca tgtaactcgc cttgatcgtt
 1561 gggaaccgga gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg tgacaccacg atgcctgtag
 1621 caatggcaac aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact acttactcta gcttcccggc
 1681 aacaattaat agactggatg gaggcggata aagttgcagg accacttctg cgctcggccc
 1741 ttccggctgg ctggtttatt gctgataaat ctggagccgg tgagcgtggg tctcgcggta
 1801 tcattgcagc actggggcca gatggtaagc cctcccgtat cgtagttatc tacacgacgg
 1861 ggagtcaggc aactatggat gaacgaaata gacagatcgc tgagataggt gcctcactga
 1921 ttaagcattg gtaactgtca gaccaagttt actcatatat actttagatt gatttaaaac
 1981 ttcattttta atttaaaagg atctaggtga agatcctttt tgataatctc atgaccaaaa
 2041 tcccttaacg tgagttttcg ttccactgag cgtcagaccc cgtagaaaag atcaaaggat
 2101 cttcttgaga tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc
 2161 taccagcggt ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg aaggtaactg
 2221 gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg tccttctagt gtagccgtag ttaggccacc
 2281 acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg ttaccagtgg
 2341 ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg
 2401 ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa
 2461 cgacctacac cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc acgcttcccg
 2521 aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga gagcgcacga
 2581 gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt cgccacctct
 2641 gacttgagcg tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca
 2701 gcaacgcggc ctttttacgg ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac atgttctttc
 2761 ctgcgttatc ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga gctgataccg
 2821 ctcgccgcag ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg gaagagcgcc
 2881 tgatgcggta ttttctcctt acgcatctgt gcggtatttc acaccgcata tggtgcactc
 2941 tcagtacaat ctgctctgat gccgcatagt taagccagta tacactccgc tatcgctacg
 3001 tgactgggtc atggctgcgc cccgacaccc gccaacaccc gctgacgcgc cctgacgggc
 3061 ttgtctgctc ccggcatccg cttacagaca agctgtgacc gtctccggga gctgcatgtg
 3121 tcagaggttt tcaccgtcat caccgaaacg cgcgaggcag cagatcaatt cgcgcgcgaa
 3181 ggcgaagcgg catgcattta cgttgacacc atcgaatggc gcaaaacctt tcgcggtatg
 3241 gcatgatagc gcccggaaga gagtcaattc agggtggtga atgtgaaacc agtaacgtta
 3301 tacgatgtcg cagagtatgc cggtgtctct tatcagaccg tttcccgcgt ggtgaaccag
 3361 gccagccacg tttctgcgaa aacgcgggaa aaagtggaag cggcgatggc ggagctgaat
 3421 tacattccca accgcgtggc acaacaactg gcgggcaaac agtcgttgct gattggcgtt
 3481 gccacctcca gtctggccct gcacgcgccg tcgcaaattg tcgcggcgat taaatctcgc
 3541 gccgatcaac tgggtgccag cgtggtggtg tcgatggtag aacgaagcgg cgtcgaagcc
 3601 tgtaaagcgg cggtgcacaa tcttctcgcg caacgcgtca gtgggctgat cattaactat
 3661 ccgctggatg accaggatgc cattgctgtg gaagctgcct gcactaatgt tccggcgtta
 3721 tttcttgatg tctctgacca gacacccatc aacagtatta ttttctccca tgaagacggt
 3781 acgcgactgg gcgtggagca tctggtcgca ttgggtcacc agcaaatcgc gctgttagcg
 3841 ggcccattaa gttctgtctc ggcgcgtctg cgtctggctg gctggcataa atatctcact
 3901 cgcaatcaaa ttcagccgat agcggaacgg gaaggcgact ggagtgccat gtccggtttt
 3961 caacaaacca tgcaaatgct gaatgagggc atcgttccca ctgcgatgct ggttgccaac
 4021 gatcagatgg cgctgggcgc aatgcgcgcc attaccgagt ccgggctgcg cgttggtgcg
 4081 gatatctcgg tagtgggata cgacgatacc gaagacagct catgttatat cccgccgtca
 4141 accaccatca aacaggattt tcgcctgctg gggcaaacca gcgtggaccg cttgctgcaa
 4201 ctctctcagg gccaggcggt gaagggcaat cagctgttgc ccgtctcact ggtgaaaaga
 4261 aaaaccaccc tggcgcccaa tacgcaaacc gcctctcccc gcgcgttggc cgattcatta
 4321 atgcagctgg cacgacaggt ttcccgactg gaaagcgggc agtgagcgca acgcaattaa
 4381 tgtgagttag cgcgaattga tctg
//

pTrcHisB载体质粒图谱pdf版和相关资料下载

pTrcHisB载体应用举例

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