| 出品公司: | Promega |
|---|---|
| 载体名称: | pRL-TK |
| 质粒类型: | 哺乳细胞表达；启动子增强子报告系统 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 启动子: | HSV TK |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4045bp |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 氨苄青霉素(Ampicillin) |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | pRL-TK是海肾荧光素酶报告载体，含有SV40增强子。 |
| 产品目录号: | E2241 |
| 稳定性: | 瞬表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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载体基本信息
载体图谱质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
pRL 家族是野生型海肾萤光素酶(Rluc) 报告基因对照载体。pRL 载体提供组成型表达的海肾萤光素酶，可与一个萤火虫萤 光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾萤光素酶的表达为实验的萤火虫萤光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL 载 体包含一个编码海肾萤光素酶(Rluc) 的cDNA, 这个cDNA 从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis) 中克隆而来。目前 有四个不同的启动子构造。其中HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK) 相对较弱， 更适用于海肾萤光素酶报告基因载体 的中性组成型表达。早期SV40 增强子/ 启动子区域(pRL-SV40) 和CMV 极早期增强子/ 启动子区域(pRL-CMV)一般提供高 水平转录，因此可能不适于作为实验载体带有强调控元件的共报告基因。一般我们建议在将要应用的目标细胞中验证某一 个特定共报告基因的性能。除了经过修饰的Rluc 报告基因外，所有pRL载体均是从dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分离而 来，这样可以使用对dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性内切酶进行消化。
载体序列
LOCUS pRL-TK 4045 bp DNA SYN
DEFINITION pRL-TK
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4045
/organism="pRL-TK"
/mol_type="other DNA"
CDS 332..796
/label="ORF frame 2"
promoter complement(532..680)
/label="TATA_promoter"
promoter 543..758
/label="TK_promoter"
misc_feature 829..961
/label="chim_int"
promoter 1006..1024
/label="T7_promoter"
CDS 1034..1969
/label="ORF frame 2"
terminator complement(1997..2116)
/label="SV40_PA_terminator"
misc_feature complement(2011..2030)
/label="EBV_rev_primer"
promoter 2289..2317
/label="AmpR_promoter"
gene 2359..3219
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS 2359..3219
/label="ORF frame 1"
rep_origin 3374..3993
/label="pBR322_origin"
ORIGIN
1 AGATCTAAAT GAGTCTTCGG ACCTCGCGGG GGCCGCTTAA GCGGTGGTTA GGGTTTGTCT
61 GACGCGGGGG GAGGGGGAAG GAACGAAACA CTCTCATTCG GAGGCGGCTC GGGGTTTGGT
121 CTTGGTGGCC ACGGGCACGC AGAAGAGCGC CGCGATCCTC TTAAGCACCC CCCCGCCCTC
181 CGTGGAGGCG GGGGTTTGGT CGGCGGGTGG TAACTGGCGG GCCGCTGACT CGGGCGGGTC
241 GCGCGCCCCA GAGTGTGACC TTTTCGGTCT GCTCGCAGAC CCCCGGGCGG CGCCGCCGCG
301 GCGGCGACGG GCTCGCTGGG TCCTAGGCTC CATGGGGACC GTATACGTGG ACAGGCTCTG
361 GAGCATCCGC ACGACTGCGG TGATATTACC GGAGACCTTC TGCGGGACGA GCCGGGTCAC
421 GCGGCTGACG CGGAGCGTCC GTTGGGCGAC AAACACCAGG ACGGGGCACA GGTACACTAT
481 CTTGTCACCC GGAGGCGCGA GGGACTGCAG GAGCTTCAGG GAGTGGCGCA GCTGCTTCAT
541 CCCCGTGGCC CGTTGCTCGC GTTTGCTGGC GGTGTCCCCG GAAGAAATAT ATTTGCATGT
601 CTTTAGTTCT ATGATGACAC AAACCCCGCC CAGCGTCTTG TCATTGGCGA ATTCGAACAC
661 GCAGATGCAG TCGGGGCGGC GCGGTCCCAG GTCCACTTCG CATATTAAGG TGACGCGTGT
721 GGCCTCGAAC ACCGAGCGAC CCTGCAGCGA CCCGCTTAAA AGCTTGATTC TTCTGACACA
781 ACAGTCTCGA ACTTAAGCTG CAGAAGTTGG TCGTGAGGCA CTGGGCAGGT AAGTATCAAG
841 GTTACAAGAC AGGTTTAAGG AGACCAATAG AAACTGGGCT TGTCGAGACA GAGAAGACTC
901 TTGCGTTTCT GATAGGCACC TATTGGTCTT ACTGACATCC ACTTTGCCTT TCTCTCCACA
961 GGTGTCCACT CCCAGTTCAA TTACAGCTCT TAAGGCTAGA GTACTTAATA CGACTCACTA
1021 TAGGCTAGCC ACCATGACTT CGAAAGTTTA TGATCCAGAA CAAAGGAAAC GGATGATAAC
1081 TGGTCCGCAG TGGTGGGCCA GATGTAAACA AATGAATGTT CTTGATTCAT TTATTAATTA
1141 TTATGATTCA GAAAAACATG CAGAAAATGC TGTTATTTTT TTACATGGTA ACGCGGCCTC
1201 TTCTTATTTA TGGCGACATG TTGTGCCACA TATTGAGCCA GTAGCGCGGT GTATTATACC
1261 AGACCTTATT GGTATGGGCA AATCAGGCAA ATCTGGTAAT GGTTCTTATA GGTTACTTGA
1321 TCATTACAAA TATCTTACTG CATGGTTTGA ACTTCTTAAT TTACCAAAGA AGATCATTTT
1381 TGTCGGCCAT GATTGGGGTG CTTGTTTGGC ATTTCATTAT AGCTATGAGC ATCAAGATAA
1441 GATCAAAGCA ATAGTTCACG CTGAAAGTGT AGTAGATGTG ATTGAATCAT GGGATGAATG
1501 GCCTGATATT GAAGAAGATA TTGCGTTGAT CAAATCTGAA GAAGGAGAAA AAATGGTTTT
1561 GGAGAATAAC TTCTTCGTGG AAACCATGTT GCCATCAAAA ATCATGAGAA AGTTAGAACC
1621 AGAAGAATTT GCAGCATATC TTGAACCATT CAAAGAGAAA GGTGAAGTTC GTCGTCCAAC
1681 ATTATCATGG CCTCGTGAAA TCCCGTTAGT AAAAGGTGGT AAACCTGACG TTGTACAAAT
1741 TGTTAGGAAT TATAATGCTT ATCTACGTGC AAGTGATGAT TTACCAAAAA TGTTTATTGA
1801 ATCGGACCCA GGATTCTTTT CCAATGCTAT TGTTGAAGGT GCCAAGAAGT TTCCTAATAC
1861 TGAATTTGTC AAAGTAAAAG GTCTTCATTT TTCGCAAGAA GATGCACCTG ATGAAATGGG
1921 AAAATATATC AAATCGTTCG TTGAGCGAGT TCTCAAAAAT GAACAATAAT TCTAGAGCGG
1981 CCGCTTCGAG CAGACATGAT AAGATACATT GATGAGTTTG GACAAACCAC AACTAGAATG
2041 CAGTGAAAAA AATGCTTTAT TTGTGAAATT TGTGATGCTA TTGCTTTATT TGTAACCATT
2101 ATAAGCTGCA ATAAACAAGT TAACAACAAC AATTGCATTC ATTTTATGTT TCAGGTTCAG
2161 GGGGAGGTGT GGGAGGTTTT TTAAAGCAAG TAAAACCTCT ACAAATGTGG TAAAATCGAT
2221 AAGGATCCAG GTGGCACTTT TCGGGGAAAT GTGCGCGGAA CCCCTATTTG TTTATTTTTC
2281 TAAATACATT CAAATATGTA TCCGCTCATG AGACAATAAC CCTGATAAAT GCTTCAATAA
2341 TATTGAAAAA GGAAGAGTAT GAGTATTCAA CATTTCCGTG TCGCCCTTAT TCCCTTTTTT
2401 GCGGCATTTT GCCTTCCTGT TTTTGCTCAC CCAGAAACGC TGGTGAAAGT AAAAGATGCT
2461 GAAGATCAGT TGGGTGCACG AGTGGGTTAC ATCGAACTGG ATCTCAACAG CGGTAAGATC
2521 CTTGAGAGTT TTCGCCCCGA AGAACGTTTT CCAATGATGA GCACTTTTAA AGTTCTGCTA
2581 TGTGGCGCGG TATTATCCCG TATTGACGCC GGGCAAGAGC AACTCGGTCG CCGCATACAC
2641 TATTCTCAGA ATGACTTGGT TGAGTACTCA CCAGTCACAG AAAAGCATCT TACGGATGGC
2701 ATGACAGTAA GAGAATTATG CAGTGCTGCC ATAACCATGA GTGATAACAC TGCGGCCAAC
2761 TTACTTCTGA CAACGATCGG AGGACCGAAG GAGCTAACCG CTTTTTTGCA CAACATGGGG
2821 GATCATGTAA CTCGCCTTGA TCGTTGGGAA CCGGAGCTGA ATGAAGCCAT ACCAAACGAC
2881 GAGCGTGACA CCACGATGCC TGTAGCAATG GCAACAACGT TGCGCAAACT ATTAACTGGC
2941 GAACTACTTA CTCTAGCTTC CCGGCAACAA TTAATAGACT GGATGGAGGC GGATAAAGTT
3001 GCAGGACCAC TTCTGCGCTC GGCCCTTCCG GCTGGCTGGT TTATTGCTGA TAAATCTGGA
3061 GCCGGTGAGC GTGGGTCTCG CGGTATCATT GCAGCACTGG GGCCAGATGG TAAGCCCTCC
3121 CGTATCGTAG TTATCTACAC GACGGGGAGT CAGGCAACTA TGGATGAACG AAATAGACAG
3181 ATCGCTGAGA TAGGTGCCTC ACTGATTAAG CATTGGTAAC TGTCAGACCA AGTTTACTCA
3241 TATATACTTT AGATTGATTT AAAACTTCAT TTTTAATTTA AAAGGATCTA GGTGAAGATC
3301 CTTTTTGATA ATCTCATGAC CAAAATCCCT TAACGTGAGT TTTCGTTCCA CTGAGCGTCA
3361 GACCCCGTAG AAAAGATCAA AGGATCTTCT TGAGATCCTT TTTTTCTGCG CGTAATCTGC
3421 TGCTTGCAAA CAAAAAAACC ACCGCTACCA GCGGTGGTTT GTTTGCCGGA TCAAGAGCTA
3481 CCAACTCTTT TTCCGAAGGT AACTGGCTTC AGCAGAGCGC AGATACCAAA TACTGTTCTT
3541 CTAGTGTAGC CGTAGTTAGG CCACCACTTC AAGAACTCTG TAGCACCGCC TACATACCTC
3601 GCTCTGCTAA TCCTGTTACC AGTGGCTGCT GCCAGTGGCG ATAAGTCGTG TCTTACCGGG
3661 TTGGACTCAA GACGATAGTT ACCGGATAAG GCGCAGCGGT CGGGCTGAAC GGGGGGTTCG
3721 TGCACACAGC CCAGCTTGGA GCGAACGACC TACACCGAAC TGAGATACCT ACAGCGTGAG
3781 CTATGAGAAA GCGCCACGCT TCCCGAAGGG AGAAAGGCGG ACAGGTATCC GGTAAGCGGC
3841 AGGGTCGGAA CAGGAGAGCG CACGAGGGAG CTTCCAGGGG GAAACGCCTG GTATCTTTAT
3901 AGTCCTGTCG GGTTTCGCCA CCTCTGACTT GAGCGTCGAT TTTTGTGATG CTCGTCAGGG
3961 GGGCGGAGCC TATGGAAAAA CGCCAGCAAC GCGGCCTTTT TACGGTTCCT GGCCTTTTGC
4021 TGGCCTTTTG CTCACATGGC TCGAC
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