pFN31A Nluc-CMV-Hygro-Flexi

价格:1500元

联系方式:I47-825O-882O

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pFN31A载体基本信息

出品公司: Promega
载体名称: pFN31A ; pFN31A Nluc-CMV-Hygro Flexi
质粒类型: 哺乳动物载体;NanoLuc素酶报告载体
高拷贝/低拷贝: --
克隆方法: 限制性内切酶,多克隆位点
启动子: CMV IE
载体大小: 6308 bp
5' 测序引物及序列: T7 Forward:TAATACGACTCACTATAGGG
3' 测序引物及序列: --
载体标签: NanoLuc
载体抗性: 氨苄青霉素
筛选标记: 潮霉素(Hygromycin)
克隆菌株: TOP10等常规菌株
宿主细胞(系): 常规哺乳动物细胞等
备注: pFN31A-Nluc-CMV-Hygro-Flexi载体表达NanoLuc融合蛋白;NanoLuc萤光素酶(Nluc)更小(19.1kDa)、更亮(比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍)。
产品目录号: N1311
稳定性: 瞬表达或稳表达
组成型/诱导型: 组成型
病毒/非病毒: 非病毒

pFN31A载体质粒图谱和多克隆位点信息

pFN31A Nluc CMV-Hygro Flexi载体图谱



pFN31A载体图谱



CMV immediate early enhancer/promoter                        1–742
Chimeric intron                                              857–989
T7 RNA polymerase promoter (–17 to +3)                       1033–1052
NanoLuc® protein coding region                               1065–1577
Linker                                                       1578–1589
SgfI                                                         1590–1597
Barnase coding region                                        1621–1956
PmeI                                                         1958–1965
SV40 late poly(A) region                                     2117–2338
SV40 early enhancer/promoter                                 2437–2849
Synthetic hygromycin (Hygr) coding region                    2880–3917
Synthetic poly(A) signal                                     3941–3989
β-lactamase (Ampr) coding region                             4250–5110
ColE1-derived plasmid replication origin                     5265–5301

pFN31A载体简介

NanoLuc萤光素酶融合表达载体pFN31A

更小(19.1kDa)、更亮(比萤火虫和海肾萤光素酶亮度高 100 倍)的 NanoLuc萤光素酶(Nluc)非常适用于蛋白融合应用。NanoLuc 融合蛋白应用广泛:作为蛋白稳定性报告基因、生物发光法细胞成像(BLI)探针或作为供体信号用于生物发光共振能量转移(BRET)研究蛋白: 蛋白或蛋白: 小分子相互作用研究。
NanoLuc 蛋白融合载体可方便的 N- 或 C-端融合 Nluc 和您感兴趣蛋白的融合蛋白;有两类形式载体可供选择:
pNLF 载体系列:产生 N- 或 C- 端融合全长 Nluc 的融合蛋白或应用传统的克隆方法(多克隆位点)将分泌型 Nluc 克隆到感兴趣的蛋白 N 端。 
pF 载体系列:使用 Flexi Vector Cloning System 产生 N- 端或 C- 端融合蛋白;Flexi Vector Cloning System 是一种直接克隆方法,基于两种稀有酶切位点 SgfI 和 PmeI,可以在 Flexi 载体之间转换蛋白编码序列,快速、高效和高保真。

特点 - 优点
 轻松定量蛋白丰度变化:使用 Nano-Glo Luciferase Assay System 进行单一试剂加样,来定量 NanoLuc 融合蛋白的信号,进而检测细胞内蛋白水平。
 生物相关性更高:NanoLuc 报告基因光信号更强,内源性表达水平的 NanoLuc 融合蛋白即可被检测到,可避免过度表达造成的假象。
 使蛋白的细胞内动态变化可视化:NanoLuc 报告基因光信号更强,缩短了成像曝光时间,无需反复激发样本,从而降低了激发造成的细胞毒性反应。
 改进 BRET 研究技术:NanoLuc 拥有更强的光信号,蓝移的发射光谱,因而与荧光受体的光谱交叉更少,信噪比更佳,动态范围更宽。
 灵活的克隆选择:可使用传统克隆方法或 Flexi 克隆系统轻松将 NanoLuc 与目标蛋白的 C 端或 N 端融合。
 可实现从瞬时转染到稳定转染的轻松过渡:所有载体都含有用于建立稳定细胞系的哺乳动物筛选标志物。

应用
 化合物筛选
 蛋白: 蛋白相互作用
 蛋白: 小分子相互作用
 生物发光成像
 蛋白稳定性研究

pFN31A载体序列

    1 TCAATATTGG CCATTAGCCA TATTATTCAT TGGTTATATA GCATAAATCA

   51 ATATTGGCTA TTGGCCATTG CATACGTTGT ATCTATATCA TAATATGTAC

  101 ATTTATATTG GCTCATGTCC AATATGACCG CCATGTTGGC ATTGATTATT

  151 GACTAGTTAT TAATAGTAAT CAATTACGGG GTCATTAGTT CATAGCCCAT

  201 ATATGGAGTT CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC GCCTGGCTGA

  251 CCGCCCAACG ACCCCCGCCC ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT

  301 AGTAACGCCA ATAGGGACTT TCCATTGACG TCAATGGGTG GAGTATTTAC

  351 GGTAAACTGC CCACTTGGCA GTACATCAAG TGTATCATAT GCCAAGTCCG

  401 CCCCCTATTG ACGTCAATGA CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA

  451 GTACATGACC TTACGGGACT TTCCTACTTG GCAGTACATC TACGTATTAG

  501 TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT GGCAGTACAC CAATGGGCGT

  551 GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC CCATTGACGT

  601 CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC

  651 GTAATAACCC CGCCCCGTTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG

  701 GAGGTCTATA TAAGCAGAGC TGGTTTAGTG AACCGTCAGA TCACTAGAAG

  751 CTTTATTGCG GTAGTTTATC ACAGTTAAAT TGCTAACGCA GTCAGTGCTT

  801 CTGACACAAC AGTCTCGAAC TTAAGCTGCA GAAGTTGGTC GTGAGGCACT

  851 GGGCAGGTAA GTATCAAGGT TACAAGACAG GTTTAAGGAG ACCAATAGAA

  901 ACTGGGCTTG TCGAGACAGA GAAGACTCTT GCGTTTCTGA TAGGCACCTA

  951 TTGGTCTTAC TGACATCCAC TTTGCCTTTC TCTCCACAGG TGTCCACTCC

 1001 CAGTTCAATT ACAGCTCTTA AGGCTAGAGT ATTAATACGA CTCACTATAG

 1051 GGCTAGCGCT CACCATGGTC TTCACACTCG AAGATTTCGT TGGGGACTGG

 1101 CGACAGACAG CCGGCTACAA CCTGGACCAA GTCCTTGAAC AGGGAGGTGT

 1151 GTCCAGTTTG TTTCAGAATC TCGGGGTGTC CGTAACTCCG ATCCAAAGGA

 1201 TTGTCCTGAG CGGTGAAAAT GGGCTGAAGA TCGACATCCA TGTCATCATC

 1251 CCGTATGAAG GTCTGAGCGG CGACCAAATG GGCCAGATCG AAAAAATTTT

 1301 TAAGGTGGTG TACCCTGTGG ATGATCATCA CTTTAAGGTG ATCCTGCACT

 1351 ATGGCACACT GGTAATCGAC GGGGTTACGC CGAACATGAT CGACTATTTC

 1401 GGACGGCCGT ATGAAGGCAT CGCCGTGTTC GACGGCAAAA AGATCACTGT

 1451 AACAGGGACC CTGTGGAACG GCAACAAAAT TATCGACGAG CGCCTGATCA

 1501 ACCCCGACGG CTCCCTGCTG TTCCGAGTAA CCATCAACGG AGTGACCGGC

 1551 TGGCGGCTGT GCGAACGCAT TCTGGCGGGC TCGAGCGGCG CGATCGCCAT

 1601 GGAATAAGTA AGGAATCCAC ATGGCACAGG TTATCAACAC GTTTGACGGG

 1651 GTTGCGGATT ATCTTCAGAC ATATCATAAG CTACCTGATA ATTACATTAC

 1701 AAAATCAGAA GCACAAGCCC TCGGCTGGGT GGCATCAAAA GGGAACCTTG

 1751 CAGACGTCGC TCCGGGGAAA AGCATCGGCG GAGACATCTT CTCAAACAGG

 1801 GAAGGCAAAC TCCCGGGCAA AAGCGGACGA ACATGGCGTG AAGCGGATAT

 1851 TAACTATACA TCAGGCTTCA GAAATTCAGA CCGGATTCTT TACTCAAGCG

 1901 ACTGGCTGAT TTACAAAACA ACGGACCATT ATCAGACCTT TACAAAAATC

 1951 AGATAATGTT TAAACGAATT CGGGCTCGGT ACCCGGGGAT CCTCTAGAGT

 2001 CGACCTGCAG GCATGCAAGC TGATCCGGCT GCTAACAAAG CCCGAAAGGA

 2051 AGCTGAGTTG GCTGCTGCCA CCGCTGAGCA ATAACTAGCA TAACCCCTTG

 2101 GGGCGGCCGC TTCGAGCAGA CATGATAAGA TACATTGATG AGTTTGGACA

 2151 AACCACAACT AGAATGCAGT GAAAAAAATG CTTTATTTGT GAAATTTGTG

 2201 ATGCTATTGC TTTATTTGTA ACCATTATAA GCTGCAATAA ACAAGTTAAC

 2251 AACAACAATT GCATTCATTT TATGTTTCAG GTTCAGGGGG AGATGTGGGA

 2301 GGTTTTTTTA AGCAAGTAAA ACCTCTACAA ATGTGGTAAA ATCGAATTTT

 2351 AACAAAATAT TAACGCTTAC AATTTCCTGA TGCGGTATTT TCTCCTTACG

 2401 CATCTGTGCG GTATTTCACA CCGCATACGC GGATCTGCGC AGCACCATGG

 2451 CCTGAAATAA CCTCTGAAAG AGGAACTTGG TTAGGTACCT TCTGAGGCGG

 2501 AAAGAACCAG CTGTGGAATG TGTGTCAGTT AGGGTGTGGA AAGTCCCCAG

 2551 GCTCCCCAGC AGGCAGAAGT ATGCAAAGCA TGCATCTCAA TTAGTCAGCA

 2601 ACCAGGTGTG GAAAGTCCCC AGGCTCCCCA GCAGGCAGAA GTATGCAAAG

 2651 CATGCATCTC AATTAGTCAG CAACCATAGT CCCGCCCCTA ACTCCGCCCA

 2701 TCCCGCCCCT AACTCCGCCC AGTTCCGCCC ATTCTCCGCC CCATGGCTGA

 2751 CTAATTTTTT TTATTTATGC AGAGGCCGAG GCCGCCTCGG CCTCTGAGCT

 2801 ATTCCAGAAG TAGTGAGGAG GCTTTTTTGG AGGCCTAGGC TTTTGCAAAA

 2851 AGCTCGATTC TTCTGACACT AGCGCCACCA TGAAGAAGCC CGAACTCACC

 2901 GCTACCAGCG TTGAAAAATT TCTCATCGAG AAGTTCGACA GTGTGAGCGA

 2951 CCTGATGCAG TTGTCGGAGG GCGAAGAGAG CCGAGCCTTC AGCTTCGATG

 3001 TCGGCGGACG CGGCTATGTA CTGCGGGTGA ATAGCTGCGC TGATGGCTTC

 3051 TACAAAGACC GCTACGTGTA CCGCCACTTC GCCAGCGCTG CACTACCCAT

 3101 CCCCGAAGTG TTGGACATCG GCGAGTTCAG CGAGAGCCTG ACATACTGCA

 3151 TCAGTAGACG CGCCCAAGGC GTTACTCTCC AAGACCTCCC CGAAACAGAG

 3201 CTGCCTGCTG TGTTACAGCC TGTCGCCGAA GCTATGGATG CTATTGCCGC

 3251 CGCCGACCTC AGTCAAACCA GCGGCTTCGG CCCATTCGGG CCCCAAGGCA

 3301 TCGGCCAGTA CACAACCTGG CGGGATTTCA TTTGCGCCAT TGCTGATCCC

 3351 CATGTCTACC ACTGGCAGAC CGTGATGGAC GACACCGTGT CCGCCAGCGT

 3401 AGCTCAAGCC CTGGACGAAC TGATGCTGTG GGCCGAAGAC TGTCCCGAGG

 3451 TGCGCCACCT CGTCCATGCC GACTTCGGCA GCAACAACGT CCTGACCGAC

 3501 AACGGCCGCA TCACCGCCGT AATCGACTGG TCCGAAGCTA TGTTCGGGGA

 3551 CAGTCAGTAC GAGGTGGCCA ACATCTTCTT CTGGCGGCCC TGGCTGGCTT

 3601 GCATGGAGCA GCAGACTCGC TACTTCGAGC GCCGGCATCC CGAGCTGGCC

 3651 GGCAGCCCTC GTCTGCGAGC CTACATGCTG CGCATCGGCC TGGATCAGCT

 3701 CTACCAGAGC CTCGTGGACG GCAACTTCGA CGATGCTGCC TGGGCTCAAG

 3751 GCCGCTGCGA TGCCATCGTC CGCAGCGGGG CCGGCACCGT CGGTCGCACA

 3801 CAAATCGCTC GCCGGAGCGC AGCCGTATGG ACCGACGGCT GCGTCGAGGT

 3851 GCTGGCCGAC AGCGGCAACC GCCGGCCCAG TACACGACCG CGCGCTAAGG

 3901 AGGTAGGTCG AGTTTAGACT CTAGCCATCA CGATGGCCGC AATAAAATAT

 3951 CTTTATTTTC ATTACATCTG TGTGTTGGTT TTTTGTGTGA ATCGATAGCG

 4001 ATAAGGATCC TCTTTGCGCT TGCGTTTTCC CTTGTCCAGA TAGCCCAGTA

 4051 GCTGACATTC ATCCGGGGTC AGCACCGTTT CTGCGGACTG GCTTTCTACG

 4101 TAATGGTTTC TTAGACGTCA GGTGGCACTT TTCGGGGAAA TGTGCGCGGA

 4151 ACCCCTATTT GTTTATTTTT CTAAATACAT TCAAATATGT ATCCGCTCAT

 4201 GAGACAATAA CCCTGATAAA TGCTTCAATA ATATTGAAAA AGGAAGAGTA

 4251 TGAGTATTCA ACATTTCCGT GTCGCCCTTA TTCCCTTTTT TGCGGCATTT

 4301 TGCCTTCCTG TTTTTGCTCA CCCAGAAACG CTGGTGAAAG TAAAAGATGC

 4351 TGAAGATCAG TTGGGTGCAC GAGTGGGTTA CATCGAACTG GATCTCAACA

 4401 GCGGTAAGAT CCTTGAGAGT TTTCGCCCCG AAGAACGTTT TCCAATGATG

 4451 AGCACTTTCA AAGTTCTGCT ATGTGGCGCG GTATTATCCC GTATTGACGC

 4501 CGGGCAAGAG CAACTCGGTC GCCGCATACA CTATTCTCAG AATGACTTGG

 4551 TTGAGTACTC ACCAGTCACA GAAAAGCATC TTACGGATGG CATGACAGTA

 4601 AGAGAATTAT GCAGTGCTGC CATAACCATG AGTGATAACA CTGCGGCCAA

 4651 CTTACTTCTG ACAACTATCG GAGGACCGAA GGAGCTAACC GCTTTTTTGC

 4701 ACAACATGGG GGATCATGTA ACTCGCCTTG ATCGTTGGGA ACCGGAGCTG

 4751 AATGAAGCCA TACCAAACGA CGAGCGTGAC ACCACGATGC CTGTAGCAAT

 4801 GGCAACAACG TTGCGCAAAC TATTAACTGG CGAACTACTT ACTCTAGCTT

 4851 CCCGGCAACA ATTAATAGAC TGGATGGAGG CGGATAAAGT TGCAGGACCA

 4901 CTTCTGCGCT CGGCCCTTCC GGCTGGCTGG TTTATTGCTG ATAAATCTGG

 4951 AGCCGGTGAG CGTGGGTCTC GCGGTATCAT TGCAGCACTG GGGCCAGATG

 5001 GTAAGCCCTC CCGTATCGTA GTTATCTACA CGACGGGGAG TCAGGCAACT

 5051 ATGGATGAAC GAAATAGACA GATCGCTGAG ATAGGTGCCT CACTGATTAA

 5101 GCATTGGTAA TTCGAAATGA CCGACCAAGC GACGCCCAAC CGGTATCAGC

 5151 TCACTCAAAG GCGGTAATAC GGTTATCCAC AGAATCAGGG GATAACGCAG

 5201 GAAAGAACAT GTGAGCAAAA GGCCAGCAAA AGGCCAGGAA CCGTAAAAAG

 5251 GCCGCGTTGC TGGCGTTTTT CCATAGGCTC CGCCCCCCTG ACGAGCATCA

 5301 CAAAAATCGA CGCTCAAGTC AGAGGTGGCG AAACCCGACA GGACTATAAA

 5351 GATACCAGGC GTTTCCCCCT GGAAGCTCCC TCGTGCGCTC TCCTGTTCCG

 5401 ACCCTGCCGC TTACCGGATA CCTGTCCGCC TTTCTCCCTT CGGGAAGCGT

 5451 GGCGCTTTCT CATAGCTCAC GCTGTAGGTA TCTCAGTTCG GTGTAGGTCG

 5501 TTCGCTCCAA GCTGGGCTGT GTGCACGAAC CCCCCGTTCA GCCCGACCGC

 5551 TGCGCCTTAT CCGGTAACTA TCGTCTTGAG TCCAACCCGG TAAGACACGA

 5601 CTTATCGCCA CTGGCAGCAG CCACTGGTAA CAGGATTAGC AGAGCGAGGT

 5651 ATGTAGGCGG TGCTACAGAG TTCTTGAAGT GGTGGCCTAA CTACGGCTAC

 5701 ACTAGAAGGA CAGTATTTGG TATCTGCGCT CTGCTGAAGC CAGTTACCTT

 5751 CGGAAAAAGA GTTGGTAGCT CTTGATCCGG CAAACAAACC ACCGCTGGTA

 5801 GCGGTGGTTT TTTTGTTTGC AAGCAGCAGA TTACGCGCAG AAAAAAAGGA

 5851 TTTCAAGAAG ATCCTTTGAT CTTTTCTACG GGGTCTGACG CTCAGTGGAA

 5901 CGAAAACTCA CGTTAAGGGA TTTTGGTCAT GAGATTATCA AAAAGGATCT

 5951 TCACCTAGAT CCTTTTATAG TCCGGAAATA CAGGAACGCA CGCTGGATGG

 6001 CCCTTCGCTG GGATGGTGAA ACCATGAAAA ATGGCAGCTT CAGTGGATTA

 6051 AGTGGGGGTA ATGTGGCCTG TACCCTCTGG TTGCATAGGT ATTCATACGG

 6101 TTAAAATTTA TCAGGCGCGA TTGCGGCAGT TTTTCGGGTG GTTTGTTGCC

 6151 ATTTTTACCT GTCTGCTGCC GTGATCGCGC TGAACGCGTT TTAGCGGTGC

 6201 GTACAATTAA GGGATTATGG TAAATCCACT TACTGTCTGC CCTCGTAGCC

 6251 ATCGAGATAA ACCGCAGTAC TCCGGCCACG ATGCGTCCGG CGTAGAGGAT

 6301 CGAGATCT

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