VRBA培养基

价格:

规格: 250g 500g

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结晶紫中性红胆盐琼脂产品基本信息

产品名称: 结晶紫中性红胆盐琼脂;VRBA培养基;VRB琼脂培养基
英文名称: Violet Red Bile Agar;VRBA;VRB Agar
培养基类型: 选择性培养基
级别: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA
产品目录号: M736-01、M736-02
产品规格: 250g、500g
产品外观: 麦秸色至粉色均一粉末。
颜色与澄清度: 紫色凝胶。
保存条件: 密封,2-25°C保存。
注意事项: 本产中含有刺激性成分。避免摄入、呼入和皮肤接触。
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VRBA培养基产品描述:

结晶紫中性红胆盐琼脂(Violet Red Bile Agar)简称VRBA培养基,是选择性固体培养基,被APHA推荐用于 检测和计数奶制品和食品中的乳糖发酵型大肠菌群,尤其是产气大肠杆菌。也用于牛奶和奶制品的微生物学 分析。

本培养基采用《细菌学分析手册》和ISO推荐配方。



VRBA培养基原理:

蛋白胨和酵母提取物提供氮、硫、碳、维生素和矿物质。培养基中的胆盐和结晶紫作为大部分革兰氏阳性菌 尤其是葡萄球菌抑制剂。在高于42°C厌氧条件下培养,可以抑制其它革兰氏阴性菌的生长。中性红是酸碱指 示剂,变色范围pH 6.8(红)~8.0(黄)。乳糖作为可发酵的碳源。大肠菌群发酵乳糖产酸,使得培养基pH降 低。乳糖发酵型微生物形成粉色至红色菌落,一般在菌落周围形成一圈红色胆盐沉降带。非乳糖发酵型微生 物则产生无色菌落。结晶紫中性红胆盐琼脂培养基中胆盐含量低,因此实验结果不仅限于肠道菌。



结晶紫中性红胆盐琼脂配方与配制方法:

成分 g/L
明胶蛋白胨 7.0
酵母提取物 3.0
氯化钠 5.0
乳糖 10.0
胆盐或胆盐3 1.5
中性红 0.03
结晶紫 0.002
琼脂 12.0
终溶液pH 7.4± 0.2

配制方法:
1. 称取38.5g本产品,用 1000ml去离子水浸泡10min。彻底混匀后,调节pH至pH 7.4±0.2。
2. 不断搅拌加热,煮沸2min。可选择121°C高温蒸汽灭菌15MIN,但会降低受伤菌的回收率。
3. 冷却至45°C后,接种,混匀倒入无菌100mm培养皿,每个培养皿倒入15-20mL培养基。
4. 待培养基凝固后,倒入3-4ml琼脂,形成一层上层琼脂,以免有菌落在培养基表面生长和蔓延。



VRBA培养基实验方法:

Spread Plate Method:
1. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
2. Aseptically inoculate agar surface with 0.1ml of well mixed diluted sample.
3. Spread the dilution evenly over the surface of the medium.
4. Using a sterile spreader device, distribute the inoculum evenly over the agar surface.
5. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35oC.

Pour Plate Method:
1. Melt agar by placing in a boiling waterbath until liquified.
2. Cool media to 45-50oC. Maintain in a 45-50o waterbath until ready to pour.
3. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.
4. Place a 1ml inoculation into a sterile petri plate.
5. Aseptically pour approximately 18ml of the cooled media (45-50oC.) over the inoculum. Carefully swirl the plate to mix the inoculum evenly.
Note: After autoclaving, do not heat media longer than 3 hours at 45-50oC. Sterile solidified medium can only be remelted once.
6. Allow to solidify.
7. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35oC.



VRBA培养基结果与分析:

乳糖发酵型微生物,包括大肠菌群,产生粉色至红色菌落,一般在菌落四周有一圈红色的胆盐沉降带。
在表面生长的E.coli菌落边缘完整,在培养基内部生长的菌落则呈凸镜状。
某些肠球菌也可能生长,产生针尖大小的枚红色菌落。
非乳糖发酵型微生物形成无色菌落。


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结晶紫中性红胆盐琼脂产品应用举例

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