脱氧胆酸盐琼脂

价格:210元

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Desoxycholate Agar产品基本信息

培养基名称 脱氧胆盐琼脂,去氧胆酸盐琼脂,DC培养基
英文名称:
Desoxycholate Agar,Desoxycholate Lactose Agar,DOC agar,DC agar
 
培养基类型: 鉴别培养基
产品目录号: M737-02
产品规格:
500g   其它规格请联系我们
 
保存条件: 密封,阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。
产品性状:
麦秸-浅粉色粉末。
粉色或橘红色凝胶。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


脱氧胆酸盐琼脂琼脂(Desoxycholate Agar)简称DC培养基,是一种鉴别培养基,用于乳制品中大肠菌群的直接计数(APHA规定)。

本产品配方采用APHA推荐配方。



Desoxycholate Agar





脱氧胆酸盐琼脂琼脂培养基工作原理


培养基中的去氧胆盐和柠檬酸盐作为大部分革兰氏阳性菌抑制剂。中性红是酸碱指示剂,变色范围pH 6.8(红)~8.0(黄)。乳糖作为可发酵的碳源。大肠菌群发酵乳糖产生大量的酸,能够克服磷酸盐缓冲体系,使得培养基pH降低。乳糖发酵型微生物形成粉色至红色菌落,一般在菌落周围形成一圈红色胆盐沉降带。非乳糖发酵型微生物则产生无色菌落。不能发酵乳糖的非肠道菌一般在该培养基上不能生长。




脱氧胆盐琼脂培养基的用途:


脱氧胆酸盐琼脂琼脂培养基被APHA推荐用于乳制品中大肠菌群的直接计数。
DC培养基也可以用于从直肠拭子、粪便样本中分离革兰氏阴性肠道致病菌。





去氧胆盐琼脂培养基配方与配制方法


培养基成分: 含量:/L
蛋白胨 10.0 g
氯化钠 5.0 g
乳糖 10.0 g
脱氧胆酸钠 1.0 g
磷酸氢二钾 2.0 g
柠檬酸铁铵 1.0 g
柠檬酸钠 1.0 g
中性红 0.033 g
细菌学琼脂 15.0 g
终溶液pH 7.1± 0.2

配制方法:

1. 称取45.0g本产品,用 1000ml去离子水浸泡10min。彻底混匀后,调节pH至pH 7.1±0.2。

2. 瓶口覆盖纱布,在火焰上方加热煮沸1min使其完全溶解。加热时不断晃动,避免烧焦。该培养基对热敏感,不要反复加热或延长加热时间。不要用灭菌锅高温蒸汽灭菌。

3. 冷却至45°C时,接种,混匀倒入无菌100mm培养皿,每个培养皿倒入15-20mL培养基。

4. 待培养基凝固后,倒入3-4ml琼脂,形成一层上层琼脂,以免有菌落在培养基表面生长和蔓延。



实验方法


脱氧胆盐培养基可以使用倒平板法或表面接种法。接种后,倒入3-4ml脱氧胆盐琼脂作为上层琼脂,可以起到降低氧分压的作用。

牛奶及奶油中大肠菌群的增菌和计数(APHA)

1. Pipette 1-4ml of the sample (or decimal dilution of the sample) into a sterile Petri dish.
2. Cool freshly prepared Desoxycholate Agar to 42-44°C and add 10-20ml to each dish.
3. Mix the contents of the dishes by gentle tilting and rotation. 4. Allow the plates to solidify and pour on an overlay of 3-4ml of uninoculated Desoxycholate Agar.
5. When the overlay has set, invert the plates and incubate them for 18-24 hours at 35°C.
6. Count all dark red colonies measuring at least 0.5mm in diameter, and calculate the number of coliform colonies per millilitre or gram of original sample.




分离肠杆菌:

It is advisable to use Desoxycholate Agar in parallel with other plating media for this purpose.
Lightly inoculate a Desoxycholate Agar plate with faeces, rectal swab, or enrichment culture. Incubate for 18-24 hours at 35°C and examine. Non-lactose fermenters of enteric origin form colourless colonies. Non-lactose fermenters which are not of enteric origin are generally inhibited by the sodium desoxycholate in the medium. Identify suspect colonies in the usual manner.





结果与分析



乳糖发酵型微生物,包括大肠菌群,产生粉色至红色菌落,一般在菌落四周有一圈红色的胆盐沉降带。

在表面生长的E.coli菌落边缘完整,在培养基内部生长的菌落则呈凸镜状。

非乳糖发酵型微生物形成无色菌落。



典型菌落形态如下图。

去氧胆盐培养基


A. Heavy lactose fermentation

B. Reduced growth of a Gram-positive organism

C. No lactose fermentation

D. Light lactose fermentation



ATCC标准菌株在脱氧胆酸盐琼脂上生长情况如下
ATCC标准菌株	                  生长情况     菌落特征

Escherichia coli ATCC25922	  生长良好  粉色菌落,有胆盐沉降带
Salmonella typhimurium ATCC14028  生长良好  无色菌落
Shigella sonnei ATCC25931	  生长良好  麦秸色菌落
Staphylococcus aureus ATCC25923	  不能生长	
Enterococcus faecalis ATCC29212	  不能生长	

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Desoxycholate Agar产品应用举例

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