改良AE产芽孢培养基

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规格: 250g 500g

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AE Sporulation Medium产品基本信息

产品名称: 改良AE产芽孢培养基
英文名称: AE Sporulation Medium, Modified for C. perfringens
培养基类型: 营养培养基
级别: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA
产品目录号: M189-01、M189-02
产品规格: 250g、500g
保存条件: 密封,至于30度以下保存。
产品外观: 麦秸色粉末。
颜色与澄清度: 浅黄色透明液体,可能有轻微沉淀。
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。
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产品描述:

改良AE产芽孢培养基(AE Sporulation Medium, Modified)被FDA和《细菌学手册》推荐用于食品中产气荚膜梭菌的早期产芽孢,以鉴定产气荚膜梭菌。


工作原理

在食品中的产气荚膜梭菌以营养细胞的形式存在,只有产芽孢细胞才合成耐热的肠毒素。虽然肠毒素不是预先在食品中就已经形成的,但是对于某些食品的环境条件有利于芽孢产生时,毒素也可能存在于这些食品中。在测定食品或粪便样品中产气荚膜梭菌的肠毒素活性时,有必要诱导芽孢产生。

多聚蛋白胨酵母提取物提供细菌生长所必需的营养成分。磷酸盐维持pH稳定。柠檬酸铵、氯化钴、硫酸镁和碳酸钠提供芽孢产生所必需的离子。棉籽糖是可发酵的糖类。产气荚膜梭菌发酵棉籽糖产酸。为鉴定有酸生成,可取1ml菌液或向菌落在加入2滴0.04%溴百里酚蓝,如果颜色变黄,说明有酸生成。



配方与配制方法

多聚蛋白胨 10.0
酵母提取物 10.0
磷酸氢二钠 4.36
磷酸二氢钾 0.25
柠檬酸铵 1.5
七水硫酸镁 0.2.
去离子水 1000
pH 7.5 ± 0.1

配制方法: 

1.称取26.31g本产品,用去离子水溶解。
2.用2M碳酸钠溶液调节pH 7.5±0.1。
3.分装15ml到20×150 mm螺口试管中。
4.121°C灭菌15min。
5.灭菌后加入0.6ml无菌10%棉籽糖,0.2ml无菌0.66M碳酸钠和一滴0.32%氯化钴(CoCl2•6H2O)到每支试管中。
6.检验一、二个试管的pH。pH值应该为7.8±0.1。
7.在使用前,用蒸汽加热试管10min。
8.冷却后加入0.2ml过滤除菌的抗坏血酸钠。


实验方法

将2g样品接种到肝汤培养基(Chopped Liver Broth)中。
35-37°C培养20-24h后,试管中液体变浑浊的,接种到产气荚膜梭菌琼脂基础(Perfringens Agar Base)平板上。初步认定的产气荚膜梭菌需要进行生化试验验证。
传代分离物到疱肉培养(Cooked Meat Medium)中,35-37°C培养24-48h,检测肠毒素产生。
培养过后,转移2-3滴到液体巯基乙酸盐培养基(Fluid Thioglycollate Medium)中,35-37°C培养18-24h。
再用新鲜的液体巯基乙酸盐培养基重新培养4h。
将培养4h后的培养物传代到15ml 改良AEA产芽孢培养基(AEA Sporulation Medium,Modified)中。在35-37°C培养18-24h。
镜检染色涂片,观察芽孢生成情况。

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