曲霉鉴别培养基基础

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黄曲霉鉴别培养基产品基本信息

培养基名称: 曲霉鉴别培养基,曲霉素琼脂基础,曲霉鉴别培养基基础
英文名称:
Aspergillus Differentiation Medium ,Aspergillus Differentiation Medium Base
 
培养基类型: 选择性培养基,鉴别培养基
产品目录号: M716-02
产品规格:
500g      氯霉素溶液需另购。
 
保存条件: 避光,密封,阴凉干燥处保存。
产品性状:
麦秸色粉末。
凝胶呈琥珀色或麦秸色,略半透明。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在 通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


曲霉鉴别培养基(Aspergillus Differentiation Medium)是一种曲霉菌选择性和鉴别性固体培养基,用于鉴别和检测食品中产黄曲霉毒素的曲霉,特别是黄曲霉和寄生曲霉。


用于从食品中分离和增菌酵母和霉菌的理想的培养基应该具备以下条件:能够回收所有有活性的繁殖体;限制霉菌的扩张;阻遏细菌的生长;辅助对真菌的鉴别。曲霉鉴别培养基几乎完全满足以上条件。


黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)是潜在的产黄曲霉毒素的真菌。黄曲霉和寄生曲霉尤其容易在油料作物的种子、可食用的坚果和麦片中存在。黄曲霉毒素的危害性极大。黄曲霉毒素对人体是有致癌性的,吃了含黄曲霉毒素的食品会导致肝癌和免疫力下降而感染其它疾病。禽类对黄曲霉素尤其敏感,在1994年,印度有超过20万只鸡死于黄曲霉毒素污染的种子。牛虽然对黄曲霉毒素不敏感,但吃了污染的饲料后,毒素可能会转移到牛奶中。美国食品药品委员会(FDA)已经对食品和饲料中容许的黄曲霉毒素水平设立了明确的规定:食品和饲料中黄曲霉毒素容许水平是20ppb,而牛奶是0.5ppb(黄曲霉毒素M1)。


黄曲霉是一种透明的霉菌,在曲霉鉴别培养基上黄曲霉菌落的反面呈现很深的橘黄色,这种色素沉着是该菌种的鉴别特征之一。这种橘黄色色素是由培养基中的铁离子与曲霉酸或新曲霉酸反应生成的。


本配方是对Bothast和Fennel的曲霉鉴别培养基的改良。被推荐用于快速检测和增菌这两种能够产黄曲霉毒素的真菌。曲霉鉴别培养基相对于其他真菌培养基有以下优势:

1. 可溶性铁盐和酵母提取物的添加改善了色素生成水平,黄曲霉和寄生曲霉菌落的反面呈现很浓的黄色/橙色,而这正是这两种菌的鉴别性特征。

2. 蛋白胨与酵母提取物的合理配比,改善了黄曲霉的生长速度。

3. 氯硝胺和氯霉素的存在加强了对细菌和快速生长的真菌的抑制性。




曲霉鉴别培养基的用途


曲霉鉴别培养基是理想的黄曲霉和寄生曲霉检测培养基。

曲霉鉴别培养基用于曲霉增菌。

曲霉鉴别培养基也用于曲霉的计数和鉴定。




曲霉鉴别培养基的配方与配制方法


配方 g/L

蛋白胨   10
酵母提取物   20
柠檬酸铁铵   0.5
氯硝胺   0.002
琼脂   15
pH 6.3 ± 0.2	

配制方法:

1. 称取45.5g培养基粉末,加1000ml去离子水,边加热边搅动至完全溶解。

2. 121°C高温蒸汽灭菌15min。

3. 待冷却至55°C左右时,加入2ml浓度50mg/ml的氯霉素溶液,混匀后倒平板。



曲霉鉴别培养基的使用方法


食品中黄曲霉与寄生曲霉的检测方法

1. 样品处理:取40g食品样品和200ml 0.1%蛋白胨水,用匀浆器分散。或者将样品加到蛋白胨水中,每隔一段时间震荡几下,持续30分钟。

2. 样品稀释:用0.1%蛋白胨水将处理过的样品分别稀释10倍、20倍和40倍。

3. 接种:分别吸取0.1ml稀释后的样品,用涂布棒涂布在琼脂平板表面。

4. 培养:30°C下,培养42-43小时后观察菌落形态。

5. 计数符合特征的菌落。该数据作为每克食品中黄曲霉和寄生性曲霉的菌落数。

结果分析

米曲霉(Aspergillus oryzae)菌落也具有以上特征。米曲霉在亚洲发酵食品尤其是黄豆酱的制作工艺中起到重要作用,但是在其它食品中很少能够分离到。

30°C条件下培养时,黑曲霉菌落的大小和质地都与黄曲霉接近,但是反面颜色是黄白色的,43小时以后开始由黑色分生孢子出现,很容易与黄曲霉区分开来。


黄曲霉在曲霉鉴定培养基上的菌落形态见下图

曲霉鉴定培养基基础 黄曲霉

黄曲霉与寄生曲霉菌落形态的比较见下图

曲霉鉴定培养基 黄曲霉与寄生曲霉



标准菌株在曲霉鉴别培养基中的生长情况



标准菌株   拉丁名称及ATCC编号                  菌落特征

黄曲霉    Aspergillus flavus ATCC22547	      浅黄色孢子,
                                              菌落背面呈橘黄色

寄生曲霉  Aspergillus parasiticus ATCC28285   乳白色孢子,
                                              菌落背面呈橘黄色

黑曲霉   Aspergillus brasiliensis ATCC9642     黑色孢子,
                                               菌落背面呈黄白色

大肠杆菌  Escherichia coli ATCC25922           不长

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