强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)

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DRCA培养基产品基本信息

培养基名称: 强化梭菌鉴别琼脂DRCA培养基,MPN法梭菌计数培养基
英文名称:
Differential Reinforced Clostridial Agar,DRCA
 
产品目录号: M213-03
产品规格:
500g      其它规格请与我们联系
 
保存条件: 避光,密封,阴凉干燥处保存。
产品性状:
浅棕色粉末,易吸潮。
溶液加热时呈浅琥珀色,冷却后呈浅红色,半透明,偶或有深色颗粒。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在 通风橱中进行,戴口罩、手套、护 目镜。
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产品描述:


强化梭菌鉴别琼脂(Differential Reinforced Clostridial Agar)简称DRCA培养基,是液体培养基。DRCA培养基用于培养和富集厌氧菌的芽抱,也用于梭状芽抱杆菌的MPN法 计数。

强化梭菌鉴别琼脂是在强化梭菌鉴别培养基(DRCM)中加琼脂而来的。强化梭菌鉴别培养基是针对MPN(Most Probable Number)计数方法而设计的培养基。配方中的蛋白胨、酵母提取物牛肉提取物和葡萄糖提供梭菌生 长所需的营养成分。半胱氨酸作为还原剂。醋酸钠起缓冲作用和部分筛选作用。淀粉吸附代谢毒素。梭状芽抱杆 菌能够将亚硫酸盐还原成硫化物,生产硫化铁。柠檬酸铁和和亚硫酸钠是硫化物指示系统,培养基变黑表明有硫 化铁生成。刃天青钠是氧化指示剂,有氧条件下呈粉色,无氧条件下无色。





强化梭菌鉴别琼脂的用途


强化梭菌鉴别琼脂用于厌氧型细菌芽孢的分离和增菌,特别是梭状芽抱杆菌 。

DRCA培养基与DRCM培养基结合使用,检测和鉴别梭状芽胞杆菌。

向强化梭菌鉴别琼脂中添加多粘菌素B(70000 IU/L)能够抑制不产芽孢的革兰氏阴性菌的生长,提高培养基的选择 性。




强化梭菌鉴别琼脂的配方与配制方法



胰蛋白胨 5
蛋白胨 5
牛肉提取物 8
酵母提取物 1
D-葡萄糖 1
水合醋酸钠 5
可溶性淀粉 1
L-半胱氨酸盐酸盐 0.5
焦亚硫酸钠 0.5
柠檬酸铁铵 0.5
刃天青钠 0.002
琼脂 15
pH 7.1 ± 0.2



配制方法:

1. 称取42.5 g本品,加1 L去离子水溶解。

2. 边搅动边加热,煮沸1min,使其完全溶解。

3. 121ºC灭菌15min。



DRCA培养基的使用



实验流程
1. Prepare serial 10-fold dilutions of the sample in 1/4 strength Ringer’s solution or 0.1% peptone water.

2. Depending on the amount of the initial sample, transfer 1 mL or 0.1 mL of the appropriate dilution, prepared in step 1, to the bottom of a molten (45-50°C) DRCA tube.Prepare a duplicate tube using the same procedure.

3. Tighten the caps on the tubes.

4. Heat one of the duplicate DRCA tubes prepared in step 2 to 80 ± 1°C for 10 minutes to kill vegetative cells.

5. Incubate both tubes, heat-shocked and non-heat-shocked, at 35 ± 1°C for 5 days; examine for sulfite reduction.

Non-heat-shocked cultures showing blackening must be heat shocked and subcultured to DRCA for confirmation.


其它方法

Inoculate samples onto the surface of agar plates using the streak plate or spread plate technique. Samples may be inoculated into DRCA using the pour plate technique. Agar in agar deeps may be inoculated using the stab technique. DRCA may be used to overlay the membrane filter in the membrane filter technique. Incubate plates and tubes at 35 ± 1°C for 24-48 hours under anaerobic conditions. Agar deeps may be incubated under aerobic conditions when following the Prickett tube method.

结果分析

The presence of clostridia is presumptively indicated by blackening in the Agar. Heat-shocked tubes showing blackening should be considered confirmatory for the presence of sulfite-reducing clostridia.

梭菌的鉴别-DRCA培养基


菌种             拉丁名称                ATCC编号  生长情况 培养基是否变黑

双酶芽胞梭菌	Clostridium bifermentans ATCC638    好      +
产气荚膜梭菌	Clostridium perfringens	ATCC12924   好      +
败血梭状芽胞杆菌Clostridium septicum    ATCC12464   好      +

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