玫瑰红氯霉素琼脂

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规格: 250g 500g

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RBC培养基产品基本信息

产品名称: 玫瑰红氯霉素琼脂;孟加拉红氯霉素琼脂;RBC琼脂;RBC培养基
英文名称: Rose Bengal Chloramphenicol Agar;RBC Agar
培养基类型: 选择性培养基
级别: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA
产品目录号: M222-01、M222-02
产品规格: 250g、500g
产品外观: 粉色粉末。
颜色与澄清度: 枚红色,微不透明凝胶。
保存条件: 密封,2-25度保存;预制培养基2-8°C或室温条件下保存。
注意事项: 本培养基配方中含有有毒成分,避免摄入、呼入、皮肤接触。
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产品描述:

孟加拉红培养基(Rose bengal Chloramphenicol Agar)也称虎红培养基、玫瑰红氯霉素琼脂,简称RBC琼脂(RBC Agar)是一种选择性固体培养基,用于选择性分离和计数环境物质和食品原料中的酵母和霉菌。RBC琼脂可以能够减慢接合菌菌落生长速度,减少细菌污染。

真菌可以从空气、土壤、湖泊、池塘、河流、污水及井水中分离到。由于真菌是异养型的和它们可以适应各种环境的能力,经常会造成食品、未彻底清洁的食品加工设备和食品储藏设施的污染。由于酵母和霉菌能够在很宽的pH范围和温度范围内生长,所以也能够在几乎所有类型的食品和食品添加剂中生长。

传统的真菌分离培养基是利用低pH值来抑制细菌生长的,现在认为酸性筛选的效果不如抗生素。使用抗生素作为选择性抑制剂,能够提高受损的(酸敏感)真菌细胞的回收率,更好的控制细菌生长,降低对沉淀的食品颗粒计数的影响。

在孟加拉红培养基(玫瑰红氯霉素琼脂培养基)配方中,氯霉素作为细菌抑制剂,玫瑰红(孟加拉红)染料提高了培养基的选择性,能够减慢接合菌的生长速度,如脉胞菌和根霉菌,控制菌落的大小和高度。此外,玫瑰红还有助有真菌的鉴别。Smith 和 Dawson发现,pH接近中性的玫瑰红琼脂培养基(pH6.8)比酸性培养基(pH 4.2)长出的菌落更多。玫瑰红染料能够被真菌利用。大豆蛋白胨是氮源和碳源,葡萄糖作为能量物质,硫酸镁提供微量元素。另有文献使用链霉素(30 mg/L)和氯四环素作为抑制剂。



用途

孟加拉红培养基作用是用于酵母和霉菌的总数计数。

玫瑰红氯霉素琼脂培养基被ISO、APHA、《细菌学鉴定手册》推荐用于从环境和食品中选择性分离和增菌酵母及霉菌。

选用哪种培养来选择性地增菌酵母和霉菌取决于食品自身的性质和该食品中通常含有哪些微生物。玫瑰红氯霉素琼脂推荐用于主要含有革兰氏阴性杆菌的新鲜蛋白质食品。由于氯霉素的温度稳定性,玫瑰红氯霉素琼脂适合培养温度较高(35°C),培养时间较长的真菌的增菌。



配方与配制方法

成分 g/L
真菌学蛋白胨 5.0
葡萄糖 10.0
磷酸二氢钾 1.0
硫酸镁 0.5
孟加拉红(也叫虎红或者玫瑰红) 0.05
氯霉素 0.1
琼脂 15.5
Final pH 7.2±0.2  

配制方法:
用1000ml蒸馏水重悬32.15 g本产品。加热使培养基完全溶解。
121°C高温蒸汽灭菌15 min。
冷却至50°C后倒平板。
室温放置1天,以便多余的水分挥发。
配制好的培养对光和热敏感,应该置于2-8ºC冰箱中,避光保存。
将梯度稀释液直接涂布到该平板上。在黑暗处,25°C培养5天。



使用方法

在增菌酵母菌和霉菌时要采用涂布法而不能用倒平板法。接种用的琼脂培养基表面应该是干燥的。倒平板法仅能用于检测酵母菌或生长无压力的霉菌。

1. 将样品稀释成合理的浓度梯度(10,100,1000,1000...),每个浓度做2个平行试验。
2. 吸取100微升样品或样品稀释液,滴到琼脂表面。用涂布棒涂布均匀。不能倒置平板。
3. 接种后的平板在培养过程中不能受到扰动,正向放置,不要倒置。在22-30ºC培养箱中培养7天后检查结果。也可以选择在室温下培养。

结果分析

每个平板上的真菌菌落总数一般在15~150范围内。如果平板上生长的主要是霉菌,则菌落数目较少,如果酵母菌占多数,则菌落数目多。将该计数结果作为每克或每毫升食品的CFU(colony forming units)。如果不能及时计数,可将平板暂放4ºC冰箱中,但放置时间不能超过1天。



标准菌株在玫瑰红氯霉素琼脂培养基上的生长情况如下:
标准菌株 培养温度 生长情况
白色念珠菌 ATCC10231 15-30°C 生长良好,粉色光滑凸起的菌落
黑曲霉 ATCC16404 15-30°C 生长良好,菌丝体白色,菌落表面有黑点
大肠杆菌 ATCC25922 35°C 被抑制
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 35°C 被抑制
娄地青霉菌 ATCC10110 25-30°C 生长,菌落缩小,产孢子能力削弱
酿酒酵母 ATCC9763 25-30°C 生长,粉色菌落,回收率可能下降

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