大肠杆菌MLSTB-MT培养基(ISO)

价格:1590元

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月桂基硫酸盐胰蛋白胨(MUG+色氨酸)产品基本信息

培养基名称 MLSTB-MT培养基 (ISO),十二烷基硫酸盐胰蛋白示(MUG+色氨酸)
英文名称:
Modified Lauryl Sulphate Tryptose Broth with MUG &Tryptophan (ISO),MLSTB-MT (ISO)
 
培养基类型: 鉴别培养基
产品目录号: M245-01
产品规格:
250g   其它规格请联系我们
 
保存条件: 密封,阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。
产品性状:
麦秸色粉末。
琥珀色透明液体。在冰箱中冷藏的液体培养基会形成沉淀或浑浊,在室温下变清澈。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


MLSTB-MT培养基(Modified Lauryl Sulphate Tryptose Broth with MUG &Tryptophan)是大肠杆菌鉴别液体培养基,用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。

本产品配方采用ISO标准配方。



MLSTB-MT培养基




LST培养基工作原理


大肠菌群时革兰氏阴性杆菌,能够快速发酵乳糖产气(水不溶性气体)。更为准确的定义是35°C条件下能够在LST培养基和BGLB培养基中生长,并且发酵乳糖产气的革兰氏阴性杆菌。在44.5°C条件下,还能够在EC肉汤中发酵乳糖产气的属于大肠菌群的一个子集——粪大肠菌群。


表面活性剂如胆盐、蓖麻油酸钠,一直以来作为抑制成分,用于配制选择性培养基。十二烷基硫酸钠(SDS)在大肠菌选择性培养基中效果最好,完全阻止革兰氏阳性菌生长。MLSTB-MT可以在小量接种的情况下支持大肠菌的密集生长并产生大量气体。磷酸盐是pH缓冲系统,与氯化钠一起可以通过减慢乳糖发酵微生物生长速度来改善产气量。色氨酸是吲哚试验的底物。向培养后的培养基中加入0.5ml科瓦克试剂(二甲基氨基苯甲醛),1min后上层培养基变粉红色。

吲哚试验原理


向培养基中加入4-甲基伞型酮-β-D-葡糖苷酸(MUG)可以提高检测大肠埃希氏菌的灵敏度。不产气的大肠埃希菌菌株也能用MUG鉴别。MUG是一种生荧光化合物。大肠埃希氏菌具有合成Beta-葡萄糖苷酶的能力,水解MUG生成荧光化合物。在366nm波长的紫外灯下,培养基显荧光,实现大肠埃希氏菌的快速检测。





MLSTB-MT培养基的用途:


MLSTB-MT培养基是ISO 11866- 1:2005规定的用于MPN计数法初步检测水、工业废水食品中的大肠菌群。


MLSTB-MT培养基被规定(HPA National Standard Method D5)用于增菌大肠菌群,和初步验证牛奶及奶制品中大肠埃希氏菌的存在。





MLSTB-MT培养基配方与配制方法


培养基成分: 含量:/L
胰蛋白示 20.0 g
乳糖 5.0 g
K2HPO4 2.75 g
KH2PO4 2.75 g
NaCl 5.0 g
十二烷基硫酸钠(SDS) 0.1 g
4-甲基伞型酮-β-D-葡糖苷酸(MUG) 0.1 g
L-色氨酸 1.0 g
终溶液pH 6.8 ± 0.2

配制方法:

1. 称取36.7g本品,加水1L去离子水溶解。

2. 分装10ml培养基到16x160mm试管中,确保液面没过倒置的德拉姆发酵管。

3. 121°C高温蒸汽灭菌15min。




实验方法


Add 1ml of test sample per tube of single-strength medium. For double-strength medium add 10ml of test sample per tube. Repeat for each further dilution.

Incubate all inoculated tubes at 30 C for 24 hours (+ 2 hours). Incubation may be extended for up to 48 hours (+ 2 hours) if gas formation and/or turbidity not observed at 24 hours (+ 2 hours).

After incubation, add 0.5ml sodium hydroxide solution to all tubes. Examine for fluorescence under a long-wave (360-366nm) UV lamp. Add 0.5ml indole (Kovac’s) reagent to all tubes showing fluorescence. Mix & observe after 1 minute. The presence of indole (positive tube) is indicated by the formation of a red colour in the alcoholic phase.





结果与分析



在30°C条件下,在24h-48h内培养基变浑浊并且发酵管中出现气泡的视为大肠菌群。在紫外灯下(波长366nm)培养基显荧光(如上图),且吲哚试验结果阳性为大肠埃希氏菌,如下图。

MLSTB-MT培养基 吲哚试验


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