Decarboxylase Broth Base (Moeller)

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规格: 100g 20支/盒

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脱羧酶肉汤培养基产品基本信息

产品名称: 脱羧酶肉汤基础
英文名称: Decarboxylase Broth Base, Moeller
培养基类型: 鉴别培养基
级别: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA(艾礼培养基)
产品目录号: M116-01、M116-02
产品规格: 100g、20支/盒(即用型)
产品外观: 黄绿色均一粉末。
灭菌后颜色与澄清度: 紫色透明溶液,无沉淀。
保存条件: 密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。
注意事项: 避免摄入、吸入、皮肤接触。
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艾礼培养基


产品描述:

脱羧酶肉汤基础(Decarboxylase Broth Base, Moeller)加入合适的L-氨基酸后,用于基于脱羧氨基酸的能力鉴别细菌。


工作原理

脱羧酶肉汤培养基用于鉴别革兰氏阴性肠道杆菌,基于它们是否能偶脱羧氨基酸。脱羧酶肉汤用于检测赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸二水解酶活性。在鉴别克雷伯氏杆菌科与肠杆菌科细菌时,鸟氨酸脱羧酶的产生是十分有用的指标。克雷伯氏杆菌是不运动菌,不产鸟氨酸脱羧酶。而肠杆菌是能运动菌,产鸟氨酸脱羧酶,聚团肠杆菌(Enterobacter agglomerans)除外。

脱羧酶肉汤培养基中含有牛肉浸粉、动物组织胃酶水解物,提供细菌生长所需的氮源营养。葡萄糖是可发酵碳水化合物,维生素B6是脱羧酶的辅助因子。溴甲酚紫和甲酚红是酸碱指示剂。溴甲酚紫变色范围为变色范围5.2(黄色)~6.8(紫色)。甲酚红变色范围为pH7.2(黄)~8.8(紫红);pH2.0(橙色)~3.0(琥珀色)。当培养基中加入葡萄糖发酵型细菌时,由于发酵产酸,使得培养基pH降低,培养基由紫色变红色。酸的生成刺激脱羧酶活性。赖氨酸脱羧产生尸胺(cadaverine),而鸟氨酸脱羧产生腐胺(putrescine)。精氨酸先脱氢生成鸟氨酸,接着鸟氨酸脱羧生成腐胺。胺的生成使得培养基pH升高,使得指示剂由黄色变回紫色。如果检测的微生物不产合适的酶,培养基将保持酸性,呈黄色。每个待测分离物应该先接种到缺少相应氨基酸的基础培养基中。接种后的试管必需用一层无菌矿物油液封以避开空气。与空气接触会造成培养基表面的碱性反应,造成实验结果无效。



配方与配制方法

成分 g/L
胃蛋白胨 5.0
牛肉浸粉 5.0
D-葡萄糖 0.5
溴甲酚紫 0.01
甲酚红 0.005
维生素B6 0.005
pH 6.0 +/- 0.2

配制方法:
1. 称取10.52g本产品,用1000ml去离子水重悬。
2. 加入10g L-精氨酸或L-赖氨酸或L-鸟氨酸。加热使培养基完全溶解。
3. 当加入L-鸟氨酸时,需要重新调节pH。
4. 分装5ml到螺口试管中。
6. 121°C灭菌10min。



实验方法

1. Inoculate the broth by transferring one or two well-isolated colonies from an 18-24 hour culture. Do not use broth culture
2. Mix to distribute the inoculum throughout the medium.
3. Overlay the medium with 0.5 -1 ml of sterile mineral oil to protect from air.
4. Tighten caps.
5. Incubate 24 hours in 35 -37ºC.
6. Examine daily for purple color change.
7. Re-incubate up to 10 days if needed.
8. Each isolate tested should always include a control tube of base medium which does not contain the amino acid substrates. Only glucose is utilized in the control tube. If the control tube becomes positive, purple, the test is invalid.



结果与分析

35-37°C,培养4天,观察培养物特征。ATCC标准菌株在Moeller脱羧酶肉汤中生长情况如下:

标准菌株 (ATCC) Lysine Arginine Ornithine
Citrobacter freundi (ATCC8090) - +/- +/-
Enterobacter aerogenes (ATCC13048) + - +
Escherichia coli (ATCC25922) +/- +/- +/-
Klebsiella pneumoniae (ATCC13883) + - -
Proteus vulgaris (ATCC13315) - - -
Proteus mirabilis (ATCC25933) - - -
Pseudomonas aeruginosa (ATCC9027) - - +
Salmonella paratyphi A - (+) 或 + +
Salmonella typhi (ATCC6539) + (+) 或 - -
Shigella flexneri (ATCC12022) - - 或(+) -
Shigella sonnei (ATCC25931) - +/- +
Shigella dysenteriae (ATCC13313) - - 或 (+) -
Serratia marcescens (ATCC8100) + - +


+ 阳性反应,紫色
- 阴性反应,黄色或颜色不变
± 可变的
(+) 延迟的阳性反应

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脱羧酶肉汤培养基产品应用举例

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