乳糖肉汤(卵磷脂+吐温80)

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乳糖肉汤培养基产品基本信息

培养基名称: 卵磷脂吐温80乳糖肉汤培养基,乳糖肉汤培养基(卵磷脂+吐温80)
英文名称:
Lactose Broth,Lactose Broth with Lecithin and Tween
 
培养基类型: 营养培养基,鉴别培养基
产品目录号:
M227-01
 
产品规格: 250g      查看其它规格
保存条件:
避光,密封,阴凉干燥处保存。
 
产品性状: 土黄色粉末。
液体为浅黄色,透明。
注意事项:
避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
 
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产品描述:


乳糖肉汤培养基(Lactose Broth)是大肠菌群和沙门氏菌检测和预增菌液体培养基。乳糖肉汤培养 基是十分常用的培养基,用于检测食品、乳制品和水中的大肠菌群,也用于预增菌待测样品中的沙门氏菌(见下文食品中沙门氏菌的检测 和鉴定实验流程)。



乳糖肉汤培养基(卵磷脂+吐温80)的工作原理:


大多数非沙门氏菌可以发酵乳糖,乳糖发酵产生酸性的副产物,使培养基的pH降低,进而对竞争菌群 产生制菌效应。加工食品中沙门氏菌以较低含量存在,而且沙门氏菌细胞可能处于虚弱状态。乳糖肉汤为沙门氏菌的回收提供理想的环境 ,该培养基能够让受伤的细胞修复并稀释潜在的毒性物质。增菌后的乳糖肉汤培养基中含有较高的沙门氏菌/非沙门氏菌比率。


乳糖肉汤培养基也用于检测食品中的大肠菌群。用于检测大肠菌群时,在加入待测样品后,培养基浓度必须保持不变。加入卵磷脂和吐温 的乳糖肉汤培养基有助于中和消毒剂或防腐剂,这些成分可能抑制细菌细胞。中和这些残留物能减弱它们的抑制作用,辅助亚致命性受损 的细胞的回收。被美国公众健康协会推荐用于执行和确认检测饮用水、乳制品中的大肠菌群的评估实验(Presumptive Test)。

培养基配方中的乳糖为乳糖发酵型微生物的直接碳源。牛肉提取物提供微量元素和生长因子,蛋白胨是有机氮源。卵磷脂和吐温起到中和 毒素的作用。



乳糖发酵试验原理



乳糖肉汤(卵磷脂+吐温80)的用途:


Lactose Broth被FDA用于待测食品样品中沙门氏菌的预增菌。

乳糖肉汤培养基被多种标准检测方法采用,应用最广的是检测水、食品中的大肠菌群和沙门氏菌。

该培养基还被推荐用于非无菌制品的沙门氏菌与大肠杆菌的微生物限度试验。





卵磷脂吐温80乳糖肉汤培养基配方与配制方法



培养基成分: 含量:g/L
牛肉提取物 3.0
明胶蛋白胨 5.0
乳糖 5.0
卵磷脂 0.7
pH
6.9± 0.2

配制方法:

1. 称取脱水培养基13.7g,5ml吐温-80,用1L去离子水溶解。

2. 分装20ml到含有德拉姆发酵管的试管中。

3. 121°C高温蒸汽灭菌15min。

灭菌后的液体培养基置于2-8ºC保存,盖紧管盖。避免光线直射。



实验方法——水中大肠菌群的检测


接种方法与注意事项:

Lactose Broth 结果示意图



1.  将待测样品用接种到胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB培养基),培养18-24h。将菌液稀释10倍。
2.  用10ul定量接种环,沾取稀释后的培养液接种到20ml乳糖肉汤液体培养基中。
3.  35°C(或44.5°C)下,有氧培养。
4.  在培养24 ± 2 h时检查生长情况和发酵管中气泡生成量,若无明显结果,则继续培养,在48 ± 3 h时再次检查结果,如果液体变浑浊且倒置的德拉姆发酵管中有气体生成,则为阳性结果。
5.  将乳糖发酵阳性结果的试管中的培养物转接到选择性琼脂培养上做后续的鉴定实验。



实验结果与分析


所有的肠杆菌科细菌在该培养基中都能良好生长,发酵产生的酸除了使pH发生改变外,其中的丁酸还 会给培养物散发强烈的臭味。


以下2个图片是使用标准菌株对乳糖肉汤培养基测试的结果



Lactose-Broth实验结果 大肠杆菌 Lactose-Broth实验结果 空白对照


-- 图 1 图 2
产气 + -
测试菌种 大肠杆菌 空白对照



从食品样品中增菌和回收沙门氏菌——实验方法



在使用前,确保液体培养基温度恢复到室温。

1. 转移25g固体样品或25ml液体样品到无菌容器中,加入225ml无菌的乳糖肉汤培养基。用匀浆器均质。也可以每隔一分钟震荡几下,如此持续30min,确保样品均匀分散到培养基中。35ºC,培养24 小时。

2. 转移1ml上清液到合适的加富型肉汤中,如TT肉汤(Tetrathionate Broth)和亚硒酸盐胱氨酸肉汤(Selenite Cystine Broth)。35ºC培养24小时。

3. 用接种环转移上清液到合适的选择性培养基上,如HE琼脂(Hektoen Enteric Agar)、XLD琼脂(XLD Agar)和亚硫酸铋琼脂(Bismuth Sulfite Agar)。在35ºC,培养24小时。

食品中沙门氏菌的分离与鉴别 流程图

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乳糖肉汤培养基产品应用举例

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