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King琼脂A；假单胞菌琼脂P；TECH琼脂 |
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King Agar A；Pseudomonas Agar P；Pseudomonas Agar for Pyocyanin；Tech Agar |
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鉴别培养基 |
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for microbiology |
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ELITE-MEDIA（艾礼培养基） |
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M141-01、M141-02 |
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250g、500g (添加剂需另购) |
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麦秸色均一粉末。 |
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棕黄色半透明凝胶。 |
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密封，2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。 |
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避免摄入、吸入、皮肤接触。 |
CFC supplement
Kign Agar B |
产品描述：
King琼脂A(King Agar A)也称假单胞菌琼脂P(Pseudomonas Agar P)、TECH琼脂，作为鉴别培养基，通过绿脓菌素(phycocyanin)产生验证铜绿假单胞菌。
工作原理
King琼脂A加强绿脓菌素产生，抑制荧光素生成。绿脓菌素是一种蓝色、水溶性、溶于氯仿，无荧光的色素，扩散到周围培养基中。明胶蛋白胨提供必需的氮、碳、硫和痕量元素，低磷含量使对绿脓菌素产生的抑制作用最小化。甘油作为碳源。硫酸钾和氯化镁是绿脓菌素产生必需的。由于绿脓菌素的生成，铜绿假单胞菌形成的菌落周围有蓝绿色晕圈。
虽然该培养基特别增强蓝色色素产生，但是红色（绿脓菌红素）、黄绿色（荧光素铁载体）或棕色色素也可能产生，并掩蔽绿脓菌素。为了确认，可以用氯仿抽提。向培养基中加入0.5-1ml氯仿，震荡几分钟直到绿脓菌素分散到氯仿中，使溶剂变蓝。然后加入几滴盐酸，如果颜色快速由蓝变红，这证明有绿脓菌素存在。
配方与配制方法
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成分 |
g/L |
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明胶蛋白胨 |
20.0 |
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氯化镁 |
1.4 |
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硫酸钾 |
10.0 |
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琼脂 |
15.0 |
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甘油 |
10 ml |
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pH |
7.2 +/- 0.2 |
配制方法：
1. 称取41.4g本产品，用990ml去离子水重悬，加入10ml甘油。
2. 煮沸使培养基完全溶解。
3. 121°C灭菌15min。
实验方法：
平板或者试管，35 ± 2°C，培养18-24 h。如果没有生长或生长很差，重新在25-30°C培养1-2天，观察生长情况和色素产生情况。
结果与分析
30 ± 2°C培养24-48h。ATCC标准菌株在King琼脂A培养基上的生长情况如下:
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标准菌株(ATCC) |
生长情况 |
色素产生 |
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Pseudomonas fluorescens (49838) |
+++ |
- |
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Pseudomonas aeruginosa (27853) |
+++ |
蓝绿色 |
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Pseudomonas aeruginosa (25668) |
+++ |
蓝绿色 |
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Pseudomonas aeruginosa (9027) |
+++ |
蓝绿色 |
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Pseudomonas aeruginosa (10145) |
+++ |
暗绿色 |
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Pseudomonas cepacia (25609) |
+++ |
- |
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Escherichia coli (25922) |
+++ |
- |
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Enterobacter cloacae (13047) |
+++ |
- |
