沙门氏菌缓冲蛋白胨水(ISO)

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ISO标准BPW产品基本信息

培养基名称: 缓冲蛋白胨水(ISO),沙门氏菌缓冲蛋白胨水(ISO),ISO标准缓冲蛋白胨水
英文名称:
BPW(ISO),Buffered Peptone Water for Salmonella(ISO)
 
培养基类型: 营养型培养基
产品目录号:
M228-03
 
产品规格: 500g      查看其它规格
保存条件:
2-30度,避光,密封,阴凉干燥处保存。配制好的液体培养基盖紧管口,15-20°C,避光,可以保存长达3个月。
 
产品性状: 黄色粉末。
液体为浅黄色,透明。
注意事项:
避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
 
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产品描述:


Buffered Peptone Water (BPW)即缓冲蛋白胨水,本配方依据是ISO 6579,旨在作为沙门氏菌的预增菌培养基,尤其是修复受伤的沙门氏菌细胞。蛋白胨水配方有很多,针对不同微生物不同实验目的而设计的,选择时要仔细阅读产品配方。从食品中分离沙门氏菌的实验方法见下文。


缓冲蛋白胨水与沙门氏菌乳糖肉汤作用基本相同,用于待测食品样品的预增菌。前者被美国食品药品监督局FDA采用的,二后者被美国农业部USDA采用。


缓冲蛋白胨水

缓冲蛋白胨水的工作原理:


鉴于很多食品加工过程会对沙门氏菌细胞造成亚致命性伤害。BPW的作用是修复受损的沙门氏菌细胞,提高沙门氏菌的活力和含量,尤其是提高沙门氏菌与非沙门氏菌的比例。食品中的杀菌剂和防腐剂也对沙门氏菌回收造成不利影响。缓冲蛋白胨水可以稀释这些毒性物质。蛋白胨为细菌的生长提供氮源和碳源,研究表明大豆蛋白胨更适合沙门氏菌的营养需求。磷酸盐缓冲对可以维持pH稳定,pH值对于修复受损细胞是至关重要的。


沙门氏菌相对于其它肠杆菌,营养需求较低,因此该培养基配方可以起到一定的筛选作用。向BPW中加入孔雀绿可以进一步提高选择性。




用途与适用范围:


1.从杂菌多而沙门氏菌含量低的样品中分离沙门氏菌时,推荐加入0.1g孔雀绿染料,抑制竞争性细菌的生长,提高培养物中沙门氏菌与非沙门氏菌的比例。但这个方法不适合伤寒沙门氏菌,因为孔雀绿对伤寒沙门氏菌也有抑制作用。

2. 可可制品中含有杀菌物质,在检测可可粉、巧克力等食品时,向B缓冲蛋白胨水中加入酪素可以中和毒素。缓冲蛋白胨水+酪素+孔雀绿用于可可制品的沙门氏菌预增菌效果最好。

3. 缓冲蛋白胨水被美国农业部推荐用于禽类制品和肉制品中。





缓冲蛋白胨水配方与配制方法



培养基成分: 含量:g/L
酪蛋白胨 10.0
氯化钠 5.0
磷酸氢二钾(无水) 3.6
磷酸二氢钾 1.5
pH
7.0± 0.2

配制方法:

1. 称取本品20.1g,加1000ml超纯水或蒸馏水(水质非常关键!),热搅拌至完全溶解。分装到合适容器中,见下文样品处理。

2. 121°C,高温高压灭菌15min。




实验方法


1. 预增菌:取25g或25ml待测样品,加入到225ml无菌缓冲蛋白胨水中,37°C培养18h。

2. 取10ml培养物,加入到100ml 选择性增菌肉汤如Selenite Cystine Broth和Muller-Kauffmann Tetrathionate Broth中,42±1°C,培养24-48h。培养温度的上限是43°C,因此培养箱的温度设定为42°C,推荐用恒温水浴的方法培养。

3. 将培养物划线接种到选择性鉴定培养基XLD琼脂和另外一个琼脂平板上。35°C,培养18-24h。

4. 检查具有典型形态特征的沙门氏菌菌落,挑取单菌落,进行进一步的生物化学和免疫学鉴定。





实验结果与分析


下图右是鼠伤寒沙门氏菌增菌结果,左为大肠埃希氏菌。沙门氏菌菌液明显更浑浊。


缓冲蛋白胨水 鼠伤寒沙门菌-大肠杆菌



食品中沙门氏菌的分离与鉴定


食品中沙门氏菌的分离与鉴别 流程图

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