RosettaBlue(DE3)pLysS

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感受态细胞基本信息

出品公司: Novagen/ Millipore
感受态细胞名称: RosettaBlue(DE3)pLysS, Rosetta Blue(DE3)pLysS
菌株类型: E.coli
产品目录号: 71034-3, 71034-4
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃,  有氧
基因型: RosettaBlue(DE3)pLysS感受态细胞基因型
抗性: 氯霉素,四环素
质粒转化条件: 42 ℃热激
应用: 蛋白表达
诱导方法: IPTG
菌株特点: RosettaBlue系列菌株衍生于NovaBlue系列感受态细胞,该菌株既具有很高的转化效率,又具有recA endA lacIq 基因突变。对于包含有稀有密码子的真核蛋白,是加强型的蛋白表达菌株。

RosettaBlue(DE3)感受态细胞通过细胞内一个兼容的具有氯霉素抗性的质粒,补充提供了AGG, AGA, AUA, CUA, CCC 和GGA这些大肠杆菌中真核细胞的稀有密码子的tRNA。这对于表达含有稀有密码子的真核细胞蛋白具有很大的促进作用。

DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

RosettaBlue(DE3)感受态细胞无法使用蓝白斑筛选,因为在细胞中的DE3溶源噬菌体DNA序列上上含有LacZ的α肽段编码序列。

在RosettaBlue(DE3)pLysS细胞内,稀有的tRNA基因和T7溶菌酶基因存在于细胞内的同一个质粒上。

含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

菌株是recA-, endA-, lacIq , 具有很高的质粒转化效率。

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感受态细胞制备方法

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感受态细胞注意事项

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