Rosetta-gami B(DE3)pLysS

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感受态细胞基本信息

出品公司: Novagen/ Millipore
感受态细胞名称: Rosetta-gami B(DE3)pLysS, Rosetta-gamiB(DE3)pLysS, Rosetta gami B DE3 pLysS, Rosetta-gami B DE3 pLysS
菌株类型: E.coli
产品目录号: 71137-3, 71137-4
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃,  有氧
基因型: Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞菌株基因型
抗性: 氯霉素,卡那霉素四环素
质粒转化条件: 42 ℃热激
应用: 蛋白表达
诱导方法: IPTG
菌株特点:
Rosetta-gami B系列菌株来源于Origami B系列菌株,是集合了BL21系列,Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的优点,极大的增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。

Rosetta-gami B系列菌株是来源于Origami B系列菌株,携带有TrxB和Gor基因突变,提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。

本菌株含有pRARE质粒,能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有 的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA外,增加了真核细胞的在大肠杆菌中的蛋白表达水平。

Rosetta-gami B(DE3)pLysS菌株在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。

TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。

Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞来源于含有BL21系列菌株中的lacZY基因突变,能够通过IPTG高效控制目的基因的表达。

DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

Rosetta-gami B(DE3)pLysS感受态细胞能够用于氨苄抗性和壮观霉素抗性质粒的原核表达。

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感受态细胞制备方法

感受态细胞操作方法

感受态细胞注意事项

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