ATCC CRL-2724(Kasumi-1)

价格:2500元

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ATCC CRL-2724(Kasumi-1)标准细胞株基本信息

出品公司: ATCC
细胞名称: ATCC CRL-2724(Kasumi-1), Kasumi-1, 人急性粒细胞白血病细胞
存储人: H Asou
种属来源:
组织来源: 外周血
疾病特征: 急性粒细胞白血病
细胞形态: 原粒细胞
生长特性: 悬浮生长
培养基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。
产品目录号: CRL-2724
生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 
传代方法: 1:2至1:6,每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存
支原体检测: 阴性
安全等级: 1
STR:
D5S818: 9,11
D13S317: 11,13
D7S820: 8,11
D16S539: 9,12
vWA: 14
THO1: 6,9
Amelogenin: X
TPOX: 8,9
CSF1PO: 10,12
参考文献:
Tashiro S, et al. Establishment of a human acute myeloid leukemia cell line (Kasumi-1) with 8;21 chromosome translocation. Blood 77: 2031-2036, 1991. PubMed: 2018839
 
Miyoshi H, et al. The t(8;21) translocation in acute myeloid leukemia results in production of an AML1-MTG8 fusion transcript. EMBO J. 12: 2715-2721, 1993. PubMed: 8334990
 
Miyoshi H, et al. t(8;21) breakpoints on chromosome 21 in acute myeloid leukemia are clustered within a limited region of a single gene, AML1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 10431-10434, 1991. PubMed: 1720541
 
Asou H, et al. 19-nor vitamin-D analogs: a new class of potent inhibitors of proliferation and inducers of differentiation of human myeloid leukemia cell lines. Blood 92: 2441-2449, 1998. PubMed: 9746784
 


ATCC CRL-2724(Kasumi-1)人急性粒细胞白血病细胞特点和简介

这是一个带有8:21号染色体转位的白血病细胞株。 这个转位使得AML1基因和ETO (或称 MTG8)基因串联,使融合基因AML1-ETO (也称作 AML1-MTG或 RUNX1-CBF2T1)的表达升高,因而细胞产生嵌合的AML1-ETO蛋白。 这个蛋白下调CEBPA mRNA,蛋白和DNA的结合活性,而这种结合对粒性白细胞的分化是极端重要的。 这株细胞建立于一位急性白血病患者的外周血。 这株细胞髓过氧化物酶阳性,显示其髓性成熟的形态。 增生试验显示,培养的细胞对IL-3、IL-6、G-CSF(粒细胞集落刺激因子)、GM-CS(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)有响应,但对IL-1和IL-5没有响应。在体外液体培养中分别加入二甲亚砜、G-CSF、IL-5,也没有观察到粒性或嗜酸性细胞的成熟。 加入佛波酯可以看到诱导出的巨噬细胞样细胞。 1,25S-(OH)2-16,23-diene-26-F3-10-nor D3抑制其增生。

ATCC CRL-2724(Kasumi-1)人急性粒细胞白血病细胞接受后处理

1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。

 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。

 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
 

ATCC CRL-2724(Kasumi-1)人急性粒细胞白血病细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
   
     1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

     4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

    1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

    3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

ATCC CRL-2724(Kasumi-1)人急性粒细胞白血病细胞培养注意事项

 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
 
 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。

 3.   用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。

 4.   静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。

 6.   建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

 7.该细胞仅供科研使用。


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