HuLEC-5a细胞ATCC CRL-3244

价格:2500元

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HuLEC-5a细胞ATCC CRL-3244标准细胞株基本信息

细胞名称: HuLEC-5a细胞, ATCC CRL-3244细胞, HuLEC5a细胞, 人肺微血管内皮细胞
细胞又名: HULEC-5a; HULEC-5A; Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a
细胞来源: ATCC
产品货号: CRL-3244
种属来源:
组织来源:
患者年龄: 新生儿
患者性别:
细胞起源: 用pSVT载体转染人肺微血管内皮细胞,pSVT载体是一种基于pBR-322的质粒,含有猴病毒40A基因产物的编码区,即大T抗原。
受体表达: 新生儿FcRn受体(FcRn)
细胞形态: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
培养基: 完全培养基,90%;FBS,10%。
存储人: M Romsdahl
生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 
传代方法: 1:5至1:10,每周2次。
冻存条件: 92.5% 完全培养基+7.5% DMSO,液氮储存
支原体检测: 阴性
安全等级: 2
应用: 研究内皮细胞在病毒和细菌感染、癌症研究、肿瘤转移、内皮功能、细胞运输、表面分子相互作用中的作用。
STR:
Amelogenin: X
CSF1PO: 11, 12
D13S317: 13, 14
D16S539:  9, 10
D5S818: 11, 13
D7S820: 8, 10
TH01: 6, 7
TPOX: 8, 11
vWA: 16, 17
细胞说明: CRL-3244,HULEC-5a,被证明保留了内皮细胞的许多特性。因为永生化细胞是人类内皮微血管细胞不断更新的来源,在许多研究中可用它作为原代人肺内皮细胞的替代物。

 

HuLEC-5a细胞ATCC CRL-3244人肺微血管内皮细胞接受后处理

1)  收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请 拍照片发给我们。
 
2)  请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口 膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
 
3)  弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的 完全培养基。
 
4)  如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代, 传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
 
5)  接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现 污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
 

HuLEC-5a细胞ATCC CRL-3244人肺微血管内皮细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液 加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
 
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
 
     1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
 
     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
     
     3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清 液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
 
     4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
 
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
 
      1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
 
      2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血 清和 DMSO ,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻存管做好标识。
 
     3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储 存。记录冻存 管位置以便下次拿取。

HuLEC-5a细胞ATCC CRL-3244人肺微血管内皮细胞培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及时和我们联系。
 
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子等,确保细胞培 养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
 
3.   用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶壁脱落,将细 胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证 实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确 认后我们为您再免费寄送一次。
 
4.   静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇合度  80% 左右时正常传代。
 
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以一定比例和客户 自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
 
6.   建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部沟通交流。由 于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问 题解决。
 
7. 该细胞仅供科研使用。



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HuLEC-5a细胞ATCC CRL-3244标准细胞株应用举例

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