ATCC CRL-2638(CT26.WT)

价格:2000元

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ATCC CRL-2638(CT26.WT)标准细胞株基本信息

出品公司: ATCC
细胞名称: ATCC CRL-2638(CT26.WT), CT26.WT, 小鼠结肠癌细胞
存储人: N Restifo
种属来源: 小鼠
组织来源: 结肠
疾病特征: 结肠癌
细胞形态: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。
产品目录号: CRL-2638
生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 
传代方法: 1:2至1:6,每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存
支原体检测: 阴性
安全等级: 1
应用: 该细胞系可用于CT26.CL25(ATCC CRL-2639)作为检测的免疫协议模型及对宿主免疫应答的研究。
参考文献:
Wang M, et al. Active immunotherapy of cancer with a nonreplicating recombinant fowlpox virus encoding a model tumor-associated antigen. J. Immunol. 154: 4685-4692, 1995. PubMed: 7722321
 


CT26.WT小鼠结肠癌细胞特点和简介

CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)诱导形成的未分化结肠癌细胞株。 它克隆形成的细胞株命名为CT26.WT (ATCC CRL-2638)。 用包含编码典型肿瘤相关抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆转录病毒载体LXSN稳定转染CT26.WT,得到致死的亚克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)。 即使CT26.CL25表达了典型的TAA beta-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生长率与致死率也保持基本一致。 与CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)一起可用作测试免疫治疗程序的模型,并用于研究宿主免疫反应。 2001年七月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代通过BM 细胞周期蛋白处理21天消除支原体。 处理后六周,用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。 结果都呈阴性。 在本库通过支原体检测。

CT26.WT小鼠结肠癌细胞接受后处理

1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。
  2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
  3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
  4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
  5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
 

CT26.WT小鼠结肠癌细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
  2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。        1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
       4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
        1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
        2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
       3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

CT26.WT小鼠结肠癌细胞培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
  2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
  3.   用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
  4.   静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
  5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
  6.   建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
  7.该细胞仅供科研使用。


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