运动吲哚赖氨酸培养基

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规格: 100g 250g

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MIL培养基产品基本信息

产品名称: 运动吲哚赖氨酸培养基;MIL培养基
英文名称: Motility-Indole-Lysine Medium;MIL Medium
培养基类型: 鉴别培养基
级别: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA
产品目录号: M1131-01、M1131-02、M1131-03
产品规格: 100g、250g、20支/盒
产品外观: 乳白色至绿黄色均一粉末。
颜色与澄清度: 发红的紫色透明至半透明凝胶。
保存条件: 密封,2-25度保存。
注意事项: 避免呼入和皮肤接触。
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产品描述:

运动吲哚赖氨酸培养基(Motility-Indole-Lysine Medium)简称MIL培养基(MIL Medium),基于运动能力、赖氨酸脱羧酶、赖氨酸脱氨酶和吲哚生成能力,辅助鉴别肠杆菌科成员。
MIL培养基根据Reller和Merrett描述的配方配制,是一种非常有用的肠杆菌科鉴别培养基,因为只用1管培养物就可提供四种鉴别反应。MIL培养基推荐与三糖铁琼脂(TSI)和尿素琼脂(Urea Agar)一道使用,用于初步鉴定粪便样本中的肠杆菌科成员。



原理:

动物组织消化物和酪蛋白水解物是N源、C源、氨基酸和维生素来源。葡萄糖是能量来源。少量的琼脂用于沿着穿刺线展示运动能力。可运动微生物可从穿刺线向外扩张,而非运动微生物则仅沿着穿刺线生长。溴甲酚紫是酸碱指示剂。当接种的是葡萄糖发酵菌时,产生的酸使培养基pH降低,使培养基中的指示剂由紫色变黄色。酸性pH刺激脱羧酶活性。具有特异性脱羧酶的微生物降解培养基中的氨基酸,产生对应的胺。
赖氨酸脱羧产生尸胺。胺的产生使pH升高,造成培养基底部又转变为紫色。由于培养基上部分氧分压高,仍然维持酸性。如果测试的微生物不具有指定的脱羧酶,培养基的整体都保持酸性(黄色)或者仅在顶部显紫色或红色。赖氨酸脱氨在培养基的上部分产生颜色变化。在培养基顶部1厘米处赖氨酸氧化脱氨产生的化合物与柠檬酸铁铵反应产生一种酒红色或红棕色,培养基底部扔保持酸性。该反应仅在赖氨酸脱羧酶不存在的情况下才能被检测到,变形杆菌、摩根(氏)菌、普罗威登斯菌就是这种情况。具有色氨酸酶的微生物降解色氨酸产生吲哚。酪蛋白胨中含有高浓度的色氨酸。通过向琼脂表面滴加Kovacs试剂来检测吲哚,反应产生一种红色络合物。



配方与配制方法:

成分 g/L
动物组织胃酶消化物 10.00
酪蛋白水解物 10.00
酵母提取物 3.000
L-赖氨酸盐酸盐 10.00
D-葡萄糖 1.00
柠檬酸铁铵 0.50
溴甲酚紫 0.02
琼脂 2.00
Final pH 6.6±0.2 ( 25°C)  

配制方法:
用1000 ml去离子水重悬36.52 g MIL培养基。
加热至沸腾,使培养基完全溶解。
分装5ml到试管中。
121 °C高温蒸汽灭菌15min。
冷却过程中直立放置试管。



实验方法:

穿刺接种,37°C培养18-24 h。运动力、赖氨酸脱氨酶、赖氨酸脱羧酶反应先读取,再检测吲哚反应。因为加入Kovacs试剂使得培养基颜色变黄,会使赖氨酸脱羧酶阳性反应被误读为阴性。

35-37°C培养18-24 h后培养物特征如下:


接种微生物 运动力 吲哚产生 赖氨酸脱氨酶 赖氨酸脱羧酶
Enterobacter aerogenes ATCC13048 + - - +,紫色
Escherichia coli ATCC25922 + + - +,紫色
Klebsiella pneumoniae ATCC13883 - 偶尔反应 - +,紫色
Proteus mirabilis ATCC25933 + - +,顶部红棕色 -
Proteus vulgaris ATCC13315 + + +,顶部红棕色 -
Salmonella Enteritidis ATCC13076 + - - +,紫色
Shigella flexneri ATCC12022 - 偶尔反应 - -

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