TSI琼脂

价格:

规格: 250g 500g

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三糖铁琼脂产品基本信息

产品名称: 三糖铁琼脂;TSI琼脂
英文名称: Triple Sugar Iron Agar;TSI Agar
培养基类型: 鉴别培养基
级别: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA
产品目录号: M720-01、M720-02
产品规格: 250g、500g
产品外观: 浅黄色均一粉末。
颜色与澄清度: 红色透明凝胶。
保存条件: 密封,2-25°C保存。
注意事项: 避免摄入、呼入和皮肤接触。
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产品描述:

改良三糖铁琼脂(Triple Sugar Iron Agar)简称TSI琼脂(TSI Agar),根据Sulkin和Willett (1940)方法,用于鉴定肠杆菌科微生物。本培养基采用的是由Hajna改良的配方。


用途:

三糖铁琼脂应用于很多检测方法中。三糖铁琼脂被FDA推荐用于待测食品样品中沙门氏菌的预增菌。
三糖铁琼脂也用于检测水、食品中的大肠菌群。
三糖铁琼脂还被推荐用于非无菌制品的沙门氏菌与大肠杆菌的微生物限度试验。



原理:

TSI培养基的鉴别依据是肠杆菌发酵3种糖类(即葡萄糖、乳糖、蔗糖)的能力和H2S生成能力,或者说是四种代谢反应:葡萄糖发酵、乳糖和(或)蔗糖发酵、硫化物(这里指硫化铁)生成、氨基酸氧化脱氨作用。
三糖铁琼脂培养基采用的是斜面培养法,即三糖铁斜面,提供两种氧气环境:有氧的培养基表面(斜面,slant)和缺少氧气的培养基深处(试管底部,butt)。
葡萄糖发酵产酸量很少,只能影响局部的pH值。培养基中的葡萄糖含量很少,葡萄糖被耗尽后,不能发酵乳糖糖和蔗糖的肠杆菌继而以蛋白胨为碳源。氨基酸氧化脱氨产生NH3,使培养基斜面处呈碱性。能够发酵乳糖和(或)蔗糖的肠杆菌在无氧条件下能够产大量的酸,使整个培养基呈酸性。有的菌种发酵糖类时还产气(主要为二氧化碳),表现为琼脂培养基出现断裂或有气泡。硫化氢在碱性条件下与铁离子生成黑色沉淀——Fe2S3 ,使培养基变黑。但酸性条件下,Fe2S3不稳定,硫化氢则以气体形式被释放。因此对于快速产酸的微生物,H2S生成可能被掩蔽。
酚红是酸碱指示剂,变色范围: pH6.6(黄色)~pH8.4(红色) ,中性条件下显红色,当pH>8.4,变成紫红色。
蔗糖有助于大肠菌的快速检测,鉴于其发酵蔗糖的速度高于发酵乳糖的速度。另外,某些革兰氏阴性菌不能够发酵乳糖,只能发酵蔗糖。
硫代硫酸根离子为H2S生成反应提供底物。铁盐(硫酸亚铁或柠檬酸铁铵)是H2S指示剂,与H2S反应生产黑色沉淀。培养基变黑证明有H2S生成。值得注意的是,对于TSI培养基来说,这一结论的反向推论是不成立的,即培养基没有变黑并不能证明没有H2S生成。原因见上文。
牛肉提取物酵母提取物为细菌生长提供微量元素和生长因子。氯化维持培养基的渗透压平衡。蛋白胨作为主要氮源,对于不能利用乳糖和蔗糖的微生物,当直接碳源葡萄糖耗尽后蛋白胨也作为碳源。



配方与配制方法:

成分 g/L
肉浸粉 3.0 
酵母提取物 3.0 
混合蛋白胨 20.0
乳糖 10.0
蔗糖 10.0
葡萄糖 1.0
氯化钠 5.0
硫酸亚铁 0.2
硫代硫酸钠 0.3
酚红 0.025
琼脂 12.0 
Final pH 7.4 +/- 0.2 (25°C)  

配制方法:
用1L去离子水重悬64.5g本产品。加热使培养基完全溶解。
分装到试管中。
121°C高温蒸汽灭菌15min。
冷却过程中倾斜放置试管以便形成斜面。斜面要短,要留有一定的深度。

接种时要先穿刺到管底,抽出后Z型划线。推荐用棉花塞,以便指示剂充分红化。如果使用螺口试管,建议拧松盖子。



实验方法:

菌种 管底 斜面处 H2S   
Enterobacter aerogenes AG A -  
Enterobacter cloacae  AG A -  
Proteus vulgaris AG A + 黑绿色
Proteus mirabilis AG (A**) NC or ALK +  
Morganella morganii AG ALK -  
Providencia rettgeri A (ALK) NC or ALK -  
Shigella dysenteriae A NC or ALK -  
Shigella sonnei A NC or ALK -  
Shigella schmitzii A NC or ALK -  
Shigella boydii A NC or ALK -  
Shigella flexneri A NC or ALK -  
Dispar A A -  
Salmonella typhi A NC or ALK + 管底为黑色
Salmonella  typhosa A NC or ALK +  
Salmonella entericia AG NC or ALK +  
Salmonella pullorum AG NC or ALK +  
Salmonella gallinarum A NC or ALK +  
Salmonella paratyphi A   AG NC or ALK -  
Salmonella paratyphi B AG NC or ALK +  
Salmonella enteritidis AG NC or ALK +  
Salmonella typhimurium AG NC or ALK +  
Escherichia coli AG A -  
Citrobacter freundii AG A +  
Klebsiella pneumoniae A or AG NC or ALK -  
Pseudomonas aeruginosa ALK NC or ALK* -  
Alkaligenes faecalis ALK NC or ALK -  


AG =产酸(黄色)和产气
A =产酸(黄色)
NC = 不改变
ALK = 产碱(红色)
+ = 有硫化氢(黑色)
- = 无硫化氢
* 可能产色素
** 某些菌株可能不产气

35-37°C培养18-48h后,培养物特征如下:


菌种 (ATCC) 生长情况 斜面表面颜色 管底颜色 产气 H2S
Enterococcus faecalis (ATCC29212) ++ 黄色 红色 - -
Escherichia coli (ATCC25922) +++ 黄色 黄色 + -
Citrobacter freundii (ATCC8090) +++ 黄色 黄色 + +
Proteus mirabilis (ATCC7002) +++ 红色 黄色 + +
Salmonella abony (NCTC 6017) +++ 红色 黄色 -/+ +
Salmonella typhimurium (ATCC14024) +++ 红色 黄色 + +
Shigella sonnei (ATCC9290) +++ 红色 红色 - -
Shigella flexneri (ATCC12022) +++ 红色 红色 - -

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