结晶紫中性红胆盐琼脂

价格:195元

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VRBA培养基产品基本信息

培养基名称 VRBA培养基,结晶紫中性红胆盐琼脂
英文名称:
VRBA,Violet Red Bile Agar,VRBL Agar
 
培养基类型: 鉴别培养基
产品目录号: M736-02
产品规格:
500g   其它规格请联系我们
 
保存条件: 密封,阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。
产品性状:
麦秸色至粉色粉末。
深紫红色凝胶。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


结晶紫中性红胆盐琼脂(Violet Red Bile Agar)简称VRBA培养基,是选择性固体培养基,被APHA推荐用于检测和增菌奶制品和食品中的乳糖发酵型大肠菌群,尤其是产气大肠杆菌。也用于牛奶和奶制品的微生物学分析。

本产品配方采用《细菌学分析手册》和ISO标准配方。



VRBA培养基





结晶紫中性红胆盐琼脂工作原理


蛋白胨和酵母提取物提供氮、硫、碳、维生素和矿物质。培养基中的胆盐和结晶紫作为大部分革兰氏阳性菌尤其是葡萄球菌抑制剂。在高于42°C厌氧条件下培养,可以抑制其它革兰氏阴性菌的生长。中性红是酸碱指示剂,变色范围pH 6.8(红)~8.0(黄)。乳糖作为可发酵的碳源。大肠菌群发酵乳糖产酸,使得培养基pH降低。乳糖发酵型微生物形成粉色至红色菌落,一般在菌落周围形成一圈红色胆盐沉降带。非乳糖发酵型微生物则产生无色菌落。结晶紫中性红胆盐琼脂培养基中胆盐含量低,因此实验结果不仅限于肠道菌。




VRBA培养基的用途:


VRBA培养基被APHA推荐用于检测和增菌奶制品和食品中的乳糖发酵型大肠菌群,尤其是产气大肠杆菌。 VRBA培养基也用于牛奶和奶制品的微生物学分析。




VRBA培养基配方与配制方法


培养基成分: 含量:/L
明胶蛋白胨 7.0 g
酵母提取物 3.0 g
氯化钠 5.0 g
乳糖 10.0 g
胆盐或胆盐3号 1.5 g
中性红 0.03 g
结晶紫 0.002 g
琼脂 15.0 g
终溶液pH 7.4± 0.2

配制方法:

1. 称取41.5g本产品,用 1000ml去离子水浸泡10min。彻底混匀后,调节pH至pH 7.4±0.2。

2. 不断搅拌加热,煮沸2min。可选择121°C高温蒸汽灭菌15MIN,但会降低受伤菌的回收率。

3. 冷却至45°C后,接种,混匀倒入无菌100mm培养皿,每个培养皿倒入15-20mL培养基。

4. 待培养基凝固后,倒入3-4ml琼脂,形成一层上层琼脂,以免有菌落在培养基表面生长和蔓延。



实验方法


Spread Plate Method:

1. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.

2. Aseptically inoculate agar surface with 0.1ml of well mixed diluted sample.

3. Spread the dilution evenly over the surface of the medium.

4. Using a sterile spreader device, distribute the inoculum evenly over the agar surface.

5. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35ºC.



Pour Plate Method:

1. Melt agar by placing in a boiling waterbath until liquified.

2. Cool media to 45-50ºC. Maintain in a 45-50º waterbath until ready to pour.

3. Prepare decimal dilutions in sterile diluent to obtain 30-300 CFU per plate.

4. Place a 1ml inoculation into a sterile petri plate.

5. Aseptically pour approximately 18ml of the cooled media (45-50ºC.) over the inoculum. Carefully swirl the plate to mix the inoculum evenly.
Note: After autoclaving, do not heat media longer than 3 hours at 45-50ºC. Sterile solidified medium can only be remelted once.

6. Allow to solidify.

7. Incubate plates aerobically for 48 +/- 2.0 hours at 35ºC.





结果与分析



乳糖发酵型微生物,包括大肠菌群,产生粉色至红色菌落,一般在菌落四周有一圈红色的胆盐沉降带。

在表面生长的E.coli菌落边缘完整,在培养基内部生长的菌落则呈凸镜状。

某些肠球菌也可能生长,产生针尖大小的枚红色菌落。

非乳糖发酵型微生物形成无色菌落。



产气肠杆菌菌落形态如下图。

VRBA培养基 产气肠杆菌菌落


E.coli菌落形态如下图。

VRBA培养基 大肠杆菌菌落


沙门氏菌菌落形态如下图。

VRBA培养基 肠炎沙门氏菌菌落

金黄色葡萄球菌菌落形态如下图。

VRBA培养基 金葡菌菌落
菌种	        ATCC编号	    生长    菌落特征

产气肠杆菌	ATCC13048   +++	  粉色至红色菌落,四周有轻微沉淀带。
大肠埃希氏菌	ATCC25922   +++	  粉色至红色菌落,四周有红色沉淀带
肠炎沙门氏菌	ATCC13076   +++	  无色菌落
金黄色葡萄球菌	ATCC25923    -	
鼠伤寒沙门氏菌	ATCC14028   +++	  无色菌落
粪链球菌	        ATCC29212    -	
蜡样芽胞杆菌	ATCC11778    -	

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