西蒙氏柠檬酸盐培养基(ISO)

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Simmons Citrate Agar产品基本信息

培养基名称: 西蒙氏柠檬酸盐培养基,西蒙氏柠檬酸盐琼脂,西蒙氏枸橼酸盐琼脂
英文名称:
Simmons Citrate Medium,Simmons Citrate Agar (ISO 10273)
 
培养基类型: 鉴别培养基
产品目录号: M226-01
产品规格:
500g     查看其它规格
 
保存条件: 避光,密封,阴凉干燥处保存。
产品性状:
黄色粉末,有灰色或黑色颗粒。
凝胶呈绿色,或略蓝绿色。
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


西蒙氏柠檬酸盐培养基(Simmons Citrate Medium)又名西蒙氏枸橼酸盐琼脂,是一种成分确定的,合成培养基和鉴别培养基,旨在分离能够利用柠檬酸盐作为唯一碳源的微生物。西蒙氏柠檬酸盐琼脂培养基是柠檬酸盐试验(Citrate Test)使用的培养基,阳性结果表现为培养基颜色由绿变蓝,阴性则保持绿色不变。

在西蒙氏柠檬酸盐培养基配方中,溴百里酚蓝也称溴麝香草酚蓝是一种酸碱指示剂,变色范围pH6.0(黄)~7.6(蓝)。磷酸二氢铵是唯一氮源(对于非固氮菌),柠檬酸盐作为唯一碳源。柠檬酸盐发酵型微生物利用柠檬酸盐为唯一碳源,柠檬酸脱羧产生丙酮酸和二氧化碳,二氧化碳溶于水生成碱性的碳酸钠。能够利用铵盐为唯一氮源的微生物在将无机氮转化为有机氮的过程中产生氨气,氨气溶于水,生成碱性的一水合铵。上面两种作用共同导致培养基呈碱性,一般pH>7.6。因此柠檬酸盐试验阳性结果为培养基由绿色变深蓝色。

西蒙氏柠檬酸盐琼脂的配方可以根据实验母的而适当调节。本配方采用的是国际标准ISO-10273推荐的配方,主要目的是鉴别革兰氏阴性的肠杆菌科微生物。





西蒙氏柠檬酸盐培养基的用途


西蒙氏柠檬酸盐琼脂培养基是柠檬酸盐试验(Citrate Test)使用的培养基,用来检测微生物是否具有利用柠檬酸盐为碳源的能力。柠檬酸盐试验作为IMViC反应之一,用于区别大肠埃希氏菌与产气肠杆菌。

西蒙氏柠檬酸盐培养基最主要的应用是鉴别肠杆菌科微生物。大肠埃希氏菌、质贺氏菌、耶尔森氏鼠疫杆菌 和爱德华氏菌不能在该培养基上生长。而沙雷氏菌和大多数肠杆菌,柠檬酸杆菌、克雷伯氏菌、变形杆菌、普罗威登斯菌均为柠檬酸盐阳性。摩根氏菌(Morganella morganii )和鼻硬结克雷伯氏菌(Klebsiella rhinoscleromatis)除外。

西蒙氏柠檬酸盐培养基也可以用来将柠檬酸盐试验阳性的肠炎沙门氏菌、沙门氏菌亚属(II 、III 、IV)与阴性的伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌A、雏沙门氏菌(Salmonella pullorum)和鸡沙门氏菌(Salmonella gallinarum)区别开来。

西蒙氏柠檬酸盐培养基也用于从土壤中初步分离和增菌固氮菌,推荐在本配方的基础上添加1%琼脂。





西蒙氏柠檬酸盐培养基的配方与配制方法



成分: 含量:g/L
硫酸镁 0.02
磷酸二氢铵 1
磷酸氢二钾 1
柠檬酸钠 0.2
NaCl 5
琼脂 15
溴百里酚蓝 0.08
pH 6.9


配制方法:

1. 称取本品24.3g,加入1000ml去离子水,不断搅动,加热煮沸至溶解。

2. 分装到试管中,10ml/试管。

3. 121°C高温蒸汽灭菌15min。

4. 将试管置于倾斜状态冷却,使得试管底部有1~1.5cm深的培养基。



西蒙氏柠檬酸盐琼脂的使用


西蒙氏柠檬酸盐琼脂培养基可以用作斜面也可以倒平板。接种方法可以采用划线法或穿刺法。鉴于接菌量大时,容易产生假阳性,因此样品应该适当稀释。推荐的培养条件为:35°C,48h。



西蒙氏柠檬酸盐培养基 结果对照

标准菌株在西蒙氏柠檬酸盐琼脂上的生长情况如下:



菌株	        ATCC编号    生长情况 培养基颜色
产气肠杆菌	ATCC13048 	良好	蓝
大肠埃希氏菌	ATCC25922 	不长	绿
肠炎沙门氏菌	ATCC13076 	良好	蓝
痢疾志贺氏菌	ATCC13313 	不长	绿
鼠伤寒沙门氏菌	  ATCC14028 	良好	蓝
伤寒沙门氏菌	   ATCC19430 	不长	绿
小肠结肠炎耶尔森氏菌 ATCC27729 	不长	绿
肺炎克雷伯氏菌	ATCC13883	良好	蓝
福氏志贺氏菌	ATCC12022	不长	绿

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