产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)

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OPSP琼脂产品基本信息

培养基名称: OPSP琼脂,产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)
英文名称:
Perfringens Agar(OPSP)
 
培养基类型: 选择性培养基、鉴别培养基
产品目录号: M715-03
产品规格:
500g      请联系我们
 
保存条件: 避光,密封,阴凉干燥处保存。配制好的培养基于2~8度保存,放置时间不得超过7天。
产品性状:
麦秸色或浅棕色粉末,易吸潮。
液体呈浅琥珀色或麦秸色。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


Perfringens Agar(OPSP)产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)又称OPSP琼脂。产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)是选择性培养基,用于食品中产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的增菌和计数。

产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)是由Handford配方发展而来,含有3种筛选剂:100 µg/ml磺胺嘧啶钠(sulphadiazine), 0.5 µg/ml磷酸竹桃霉素(oleandomycin phosphate)和10 IU/ml硫酸多粘菌素B (polymyxin B sulphate)。OPSP琼脂是高度 选择性和专一性的产气荚膜梭菌培养基。该配方结合倒平板计数法,被推荐用于食品中产气荚膜梭菌的检测。

产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)的优势在于,其它亚硫酸盐还原型细菌如沙门氏菌(salmonellae)、变形杆菌属 (Proteus spp.)、弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)、葡萄球菌(staphylococci)、芽孢杆菌(Bacillus)等在OPSP琼脂上生长受阻。另外,双酶芽胞梭菌(Clostridium bifermentans)和丁酸芽孢梭菌(Clostridium butyricum )的生长也受到抑制。而以上这些亚硫酸盐还原型细菌在Shahidi-Ferguson 产气荚膜梭菌琼脂 (SFP琼脂)和TSCNeomycin_1.html' target='_blank'>新霉素琼 脂上会长出黑色菌落并且容易扩散,遮蔽整个培养基。产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)上偶尔出现肠球菌菌株(enterococci) ,但是肠球菌菌落呈白色,很容易与黑色的产气荚膜梭菌菌落区别开来。

加卵黄乳液的产气荚膜梭菌增菌培养基效果并不理想。一方面是因为产气荚膜梭菌菌落常常不会产生晕圈造成假阴性,另一方面产气荚膜梭菌在含卵黄乳液的培养基上往往形成大的、扩张性的菌落,导致整个培养基全部变黑,无法计数。




产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)的用途


产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)用于食品中产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的增菌、计数、和初步鉴定。



产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)的配方与配制方法


典型配方: 含量(g/L)
胰蛋白示 15
大豆蛋白胨 5
酵母提取物 5
肝脏提取物 7
柠檬酸亚铁铵 1
焦亚硫酸钠 1
Tris 1.5
琼脂 10
pH 7.3± 0.2



筛选性补充剂:

磺胺嘧啶钠	100.0mg
磷酸竹桃霉素	0.5mg
多粘菌素B	10,000IU

配制方法:

1. 称取本品45.6 g,加1000 mL去离子水重悬。边加热边搅动,使其完全溶解。

2. 121ºC灭菌15min。

3. 待冷却至50°C左右时,加入3种筛选剂溶液,混匀后倒平板。


OPSP琼脂的使用方法

按照上面的说明配制培养基。每个培养皿中倒入约25ml培养基,加入1ml待测样品的梯度浓度稀释液,混匀。在培养基表面生长的产气荚膜梭菌不大可能形成黑色菌落,除非在接种物上覆盖一层琼脂。在35°C 厌氧条件下,培养18-24 小时。

结果分析
在琼脂培养基内部,可以看到产气荚膜梭菌大而黑的菌落(直径2~4mm)。某些不常见的粪肠球菌菌株也可能出现在OPSP琼脂培养基上,但是形成的菌落小而无色,很容易与产气荚膜梭菌区别开来。在OPSP琼脂上获得黑色菌落只是初步鉴定为产 气荚膜梭菌,需要结合其它手段进一步的验证。


产气荚膜梭菌菌落形态-OPSP琼脂平板

标准菌株在产气荚膜梭菌琼脂(OPSP)中的生长情况

标准菌株: 拉丁名称与ATCC编号: 生长情况: 菌落是否变黑:
产气荚膜梭菌 Clostridium perfringens ATCC13124 +
产芽孢梭菌 Clostridium sporogenes ATCC19404 不长  

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