改良赖氨酸铁琼脂

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MLIA培养基产品基本信息

培养基名称: MLIA培养基,改良赖氨酸铁琼脂培养基
英文名称:
Modified Lysine Iron Agar
MLIA medium
 
培养基类型: 选择性培养基,鉴别培养基
产品目录号:
M718-04
 
产品规格:
500g      ►查看其它规格
 
保存条件: 避光,密封,阴凉干燥处保存。
产品性状:
麦秸色粉末,有黑色颗粒。
紫红色透明至略半透明凝胶,有深色颗粒状不溶物。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


改良赖氨酸铁琼脂(Modified Lysine Iron Agar)简称MLIA培养基是定性筛选沙门氏菌的固体培养基。

Rappold和Bolderdijk对赖氨酸铁琼脂Lysine Iron Agar)的配方进行了改良,旨在选择性分离和鉴别沙门氏菌菌种。MLIA培养基可以根据H2S生成能力来鉴别沙门氏菌。美国农业部(USDA)的研究表明,该培养基在从肉类中回收沙门氏菌方面优于其它选择性鉴别培养基。改良赖氨酸铁琼脂被美国公众健康协会(APHA)推荐用于从食品中分离沙门氏菌。




改良赖氨酸铁琼脂的工作原理:


溴甲酚紫是酸碱指示剂,变色范围为5.2(黄色)~6.8(紫色)。MLIA培养基中乳糖和蔗糖作为可发酵糖类,可加强鉴别性特征。肠道菌群发酵葡萄糖、乳糖和蔗糖产酸,表现为培养基颜色由紫色变黄色。次亚硫酸钠和柠檬酸铁铵进一步协助检测H2S。赖氨酸的添加是为了检测赖氨酸脱羧酶活性。当赖氨酸脱羧时,氨基转化成尸胺,而尸胺是碱性物质,且碱性强于发酵产生的酸性,使得培养基变成紫色。大多数产H2S的革兰氏阴性杆菌,不能够脱羧赖氨酸,因此形成的菌落是黄色的。沙门氏菌则形成紫色菌落,带有黑色中心。在MLIA培养基上,除弗氏柠檬酸杆菌外,尚未发现其他菌种菌落特征与沙门氏菌相似。脱氧胆酸盐和新生霉素是选择性抑制剂,主要抑菌谱是革兰氏阳性菌如金黄色葡萄球菌。

MLIA培养基与LIA培养基相比,增加了筛选功能,是选择性和鉴别性培养基。




MLIA培养基的用途:


改良赖氨酸铁琼脂主要用于检测食品中的沙门氏菌。



改良赖氨酸铁琼脂培养基配方与配制方法



Modified Lysine Iron Agar 配方


配制方法: 

1. 称取63.1g培养基粉末,加1000ml去离子水。 

2. 加热煮沸,不断搅拌至全部溶解。不要高温蒸汽灭菌! 

3. 冷却至55°C左右时加入过滤除菌的新生霉素钠溶液(工作浓度为15mg/L)。 

4. 轻轻摇动使其混匀,倒入无菌培养皿中。冷却至室温后,再放置30min,让表面多余的水分蒸发。 

也可以利用LIA培养基来配制MLIA培养基,配方见下表


培养基成分: 含量:g/L
赖氨酸铁琼脂培养基 34.5
乳糖 10.0
蔗糖 10.0
次亚硫酸钠 6.76
柠檬酸铁铵 0.3
脱氧胆酸盐 1.5
新生霉素 0.015
pH 6.7 ± 0.2



实验方法


培养条件:33-37°C,有氧,18-24h。

标准菌株在改良赖氨酸铁琼脂琼脂上的生长情况如下:


菌种             ATCC编号        菌落形态特征 

弗氏柠檬酸菌	ATCC33123	黄色菌落
肠炎沙门氏菌	ATCC13076	紫色菌落,中心黑色
鼠伤寒沙门氏菌	ATCC14028	紫色菌落,中心黑色
大肠埃希氏菌	ATCC25922	部分或完全抑制
奇异变形杆菌	ATCC12453	部分或完全抑制
斯氏普罗威登斯菌ATCC33672	部分或完全抑制

食品中沙门氏菌的分离与鉴别实验流程


食品中沙门氏菌的分离与鉴别 流程图

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