改良亚硫酸盐铁琼脂基础

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ISA培养基产品基本信息

培养基名称: 改良亚硫酸盐铁琼脂基础
英文名称:
Modified Iron Sulphite Agar Base
 
培养基类型: 基础培养基,鉴别培养基
产品目录号:
M215-02
 
产品规格: 500g      请联系我们
保存条件:
避光,密封,阴凉干燥处保存。配制好的培养基应该在2天内使用,不能长期放置。
 
产品性状: 麦秸色或浅棕色粉末,易吸潮。
浅琥珀色,透明至半透明。
注意事项:
避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
 
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亚硫酸盐铁琼脂(ISO标准)



产品描述:


亚硫酸盐铁琼脂(Iron Sulphite Agar)用于检测食品中引起硫化物腐败的厌氧菌。改良亚硫酸盐铁琼脂基础(Modified Iron Sulphite Agar Base)是ISO国际标准协会推荐的肉类和肉制品中梭状芽抱杆菌的检测和增菌培养基。

梭状芽孢杆菌是肉毒梭状芽抱杆菌的指示生物,也是一般的卫生指标,或者作为检测食品加工过程缺陷的手段。亚硫酸盐还原能力是梭菌的共同特征。改良亚硫酸盐铁琼脂基础利用梭菌还原亚硫酸盐产生的硫化氢与柠檬酸铁铵中的三价铁反应生成黑色沉淀使菌落变黑这一特点,来检测梭状芽抱杆菌。

培养基配方如果含有可发酵糖类会导致pH值迅速下降,硫化物以H2S气体的形式释放,而不会产生硫化铁沉淀。胰蛋白胨提供氮源、硫源、矿物质。酵母提取物提供生长因子,尤其是B族维生素。亚硫酸钠可以用焦亚硫酸钠替代。本配方中减少了亚硫酸钠的含量,鉴于亚硫酸浓度高于0.1%时会抑制某些生孢梭菌菌株的生长。因此本培养基配方可改善生孢梭菌的生长。




改良亚硫酸盐铁琼脂基础的用途


改良亚硫酸盐铁琼脂基础培养基用于肉类和肉制品中梭状芽抱杆菌的检测和增菌。亚硫酸盐铁琼脂基础培养基可改善生孢梭菌的生长。



改良亚硫酸盐琼脂基础培养基的配方与配制方法


改良亚硫酸盐铁琼脂基础培养基配方


配制方法:

1. 称取本品40.5g,加1000mL去离子重悬,浸泡10min。

2. 边加热边搅动,使其完全溶解。

3. 分装到试管中,10ml/支。

4. 121°C高温蒸汽灭菌15min。

该培养基必须现用现配,在使用的前一天配制。


改良亚硫酸盐琼脂基础的使用方法

向每个培养皿中加入1ml样品稀释液,每个待测样品采用10-1 和10-2 两个浓度梯度。待改良亚硫酸盐琼脂基础培养基温度降至50°C左右时向每个培养皿中加15ml左右的培养基,轻轻混匀。待培养基凝固后,倒入5-10ml同样的培养基,作为上层琼脂。

Deep-Shake培养法
灭菌前将培养基分装到试管中,10ml/试管。在灭菌后培养基温度降至约50°C时接菌。吸取1ml样品稀释液,加入到试管中,震荡混匀。每个浓度的样品稀释液接种2支试管。待培养基凝固后,再加入2~3ml相同的培养基作为上层琼脂。

Attenborough-Scarr法
让滤稀释后的样品通过滤膜,然后将滤膜卷起来放入试管中。待灭菌后的改良亚硫酸盐琼脂基础培养基温度降至50°C左右时,分装10ml到每支试管中。冷却凝固后,厌氧条件下培养基。

37±1°C厌氧条件下培养 24-48 h。如果要检测嗜温菌(中温菌),在37°C条件下培养。如果要检测的是嗜热菌,采用55°C或50°C培养。


亚硫酸盐铁琼脂用于检测罐头食品中的厌氧菌


标准菌株在37°C厌氧条件下培养24-48小时后,在改良亚硫酸盐铁琼脂基础培养基上生长情况如下:

标准菌株	      拉丁名称 ATCC编号	             生长情况  黑色菌落

产气荚膜梭菌	   Clostridium perfringens ATCC10543	++	✔
产气荚膜梭菌	   Clostridium perfringens ATCC13124	++	✔
肉毒素梭状芽抱杆菌  Clostridium botulinum	         ++	✔
大肠埃希氏菌	   Escherichia coli ATCC25922	        +	❌
铜绿色假单胞菌	   Pseudomonas aeruginosa ATCC27853	+/-	❌
蜡样芽胞杆菌	   Bacillus cereus ATCC11778	        +/-	❌

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