勒文氏伊红美蓝琼脂

价格:210元

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EMB培养基产品基本信息

培养基名称 勒文氏伊红美蓝琼脂,曙红美蓝琼脂,EMB培养基
英文名称:
Levine's Eosin-Methylene Blue Agar,EMB Agar
 
培养基类型: 鉴别培养基
产品目录号: M733-02
产品规格:
500g   其它规格请联系我们
 
保存条件: 密封,阴凉干燥处保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。
产品性状:
浅紫色或粉色粉末。
棕红色凝胶,略浑浊。
 
注意事项: 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。
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产品描述:


勒文氏伊红美蓝琼脂(Levine's Eosin-Methylene Blue Agar)简称L-EMB或EMB琼脂,是选择与鉴别固体培养基。

本产品配方采用《细菌学分析手册》、APHA、FDA规定的标准配方。



EMB琼脂 大肠杆菌菌落形态




伊红美蓝培养基工作原理


伊红和美蓝是酸碱指示剂,在低pH条件下,二者结合生成紫黑色沉淀。伊红和美蓝同时也是抑制剂,抑制大多数革兰氏阳性菌生长。蔗糖和乳糖作为可发酵的碳源,促进粪大肠菌群的生长,同时也提供了鉴别手段。剧烈发酵乳糖或蔗糖的细菌如大肠埃希氏菌会产生大量的酸,形成紫黑色沉淀,表现为紫黑色菌落,还会产生特征性绿色金属光泽。发酵乳糖或蔗糖速度慢的细菌则会产生粘液状粉色菌落。颜色正常或无色的菌落表明该种微生物不能发酵乳糖和蔗糖,因此不是粪大肠菌。




EMB培养基的用途:


伊红美蓝琼脂被证明是一种多功能培养基,用于区分大肠埃希氏菌与产气肠杆菌。

EMB培养基被APHA推荐用于分离粪大肠菌群,鉴别肠杆菌科微生物。

EMB琼脂被FDA推荐用于增菌食品中的大肠埃希氏菌和大肠菌群。

加入盐酸金霉素,用于快速检测白色念珠菌。

鉴别凝固酶阳性葡萄球菌,比亚碲酸盐甘氨酸琼脂(tellurite glycine agar)更有效,且能够和血浆凝固酶试验良好对接。

EMB琼脂作为选择与鉴别培养基,用于分离临床与非临床样本中革兰氏阴性杆菌。





EMB培养基配方与配制方法


培养基成分: 含量:/L
蛋白胨或明胶蛋白胨 10.0 g
乳糖 10.0 g
K2HPO4 2.0 g
曙红Y(伊红Y) 0.4 g
亚甲基蓝(美蓝) 0.065 g
琼脂 15.0 g
终溶液pH 7.1 ± 0.2

配制方法:

1. 称取37.5g本品,加水1L去离子水,煮沸至完全溶解。

2. 121°C高温蒸汽灭菌15min。

3. 冷却到60°C时,震荡培养基,使美蓝氧化,使沉淀物重悬。




实验方法


Consult listed references for information on specimen collection.(1-3,5,8,9,11,12) Infectious material should be submitted directly to the laboratory without delay and protected from excessive heat and cold. If there is to be a delay in processing, the specimen should be inoculated onto an appropriate transport media and refrigerated until inoculation.

Allow plates to warm to room temperature. The agar surface should be dry before inoculating. Inoculate and streak the specimen as soon as possible after collection. If the specimen to be cultured is on a swab, roll the swab over a small area of the agar surface and streak for isolation with a sterile loop. Incubate plates aerobically at 35-37°C for 18-24 hours and protect from light. Examine plates for colonial morphology. If negative after 24 hours, reincubate an additional 24 hours.





结果与分析



在勒文氏EMB琼脂培养基上,乳糖发酵型细菌菌落呈棕色至蓝黑色。大肠埃希氏菌菌落大,直径2-3mm,稍有汇合生长的倾向;蓝黑色,有绿色金属光泽,有紫黑色中心。肠杆菌属微生物如产气肠杆菌菌落直径4-6mm,黏液状凸起菌落,倾向于汇合生长,有棕灰色中心,通常无金属光泽。非乳糖发酵型肠道致病菌,如志贺氏菌和沙门氏菌,菌落透明无色。

白色念珠菌在35°C,10%二氧化碳条件下培养24-48h,菌落呈“蛛网状”或“羽毛状”,而其它念珠菌菌落呈正常的酵母菌菌落形态,边缘光滑,凸起,呈乳白色。

在EMB琼脂(HHT)上,乳糖或/和蔗糖发酵型大肠菌群会产生蓝黑色菌落,带有黑色中心,常伴随绿色金属光泽。其它大肠菌群则形成黏液状、粉色菌落。非乳糖或非蔗糖发酵菌,如沙门氏菌和志贺氏菌,通常形成透明、琥珀色或无色菌落。粪肠球菌菌株可能产生针尖大小或非常小的无色菌落。

某些沙门氏菌或志贺氏菌菌株不能够在EMB琼脂上生长。

某些革兰氏阳性细菌,如肠球菌、葡萄球菌和酵母菌将会在该培养基上生长,通常形成针尖大小的菌落。非致病性、非乳糖发酵型 微生物也能在该培养基上生长。因此,还需后续生化试验来区分上述微生物与致病性菌株。

某些大肠埃希氏菌也许不会产生特征性绿色金属光泽,因此金属光泽不是大肠埃希氏菌的确诊条件。

采用连续接种的方法,以确保分离得当。

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